[方法]
　　
　　1．配制50ulPCR反应混合液，包含：
　　
　　●水，34．5ul
　　
　　●20XdNTP（每种5mmol／L），2，5ul
　　
　　●10XVent聚合酶缓冲液，5．0ul
　　
　　●LMB3引物（10pmol/u1），2．5ul
　　
　　●scF讨HXhoFOR引物（10pmol/ul），2．5ul
　　
　　●scFv模板DNA（100ng），2．0u1
　　
　　●VentDNA聚合酶（2单位），1．0u1
　　
　　2．在有加热盖的热循环仪内加热反应混合液到94℃，5分钟。
　　
　　3．以94℃30秒、42℃30秒、72℃1分钟的条件共循环25次，扩增VH基因。
　　
　　4．用WizardPCR纯化试剂盒芝之PCR产物。
　　
　　5．用XhoI和NcoI消化PCR产物；但除了用XhoI替代NcoI，还需在NEB2缓冲液中进行消化。
　　
　　6．制备VL基因文库载体；但需用XhoI和NcoI消化载体.
　　
　　7．连接已消化的PCR产物和已消化的载体，并电转化到大肠杆菌TG1中,构建轻链改组文库。