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仪器用具：
37℃及65℃水浴或恒温槽
药品试剂：
质体pBluescript II SK （-）
限制酶：BamHI, PvuII 及ScaI （浓?均为10 units/μL, Invitrogen）
10×Reaction buffer 6 （0.5 M Tris-HCl, pH 7.4; 60 mM MgCl2; 0.5 M NaCl; 0.5 M KCl）
无菌水
方法步骤：
1） 取7 支微?离心管，依下表所?体积 （单位 μL） 依序加于管壁?同位置上。
◆ 每次吸取限制酶时，请换一支新的微?移液器头以免造成污染。
总体积为20 μL，短暂离心后，以微?移液器头轻轻混合，#1 置冰浴中，其余各管置于37℃反应1 h。
2） 置65℃水浴15 min 中止反应后，移置冰浴?却，即可进?电泳分析。
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