[方法]
1.将4m1包被缓冲液稀释的PEG纯化噬菌体(约1×1011TU/ml)等量分加在聚苯乙烯培养皿中。4℃在摇床上摇动过夜。
2.弃去上清并在室温下用PBST充分冲洗。
3.加6ml封闭液并在37℃摇床上摇动孵育1小时。
4.在总体积为4ml的封闭液中,将40ul血清与100/xl细菌提取物和4×1012pfu经PEG纯化的nRl载体噬菌体混合,并在室温下孵育60分钟。
5.弃去封闭液。用PBST快速洗涤。将预孵育的混合物加到平板上。4℃在摇床上摇动过夜孵育。
6.弃去溶液并在室温下用PBST充分洗板。
7.除去洗涤缓冲液。加4ml*—HCl/BSA洗脱。室温下摇床孵育10分钟。在含有-100ul 2mol/LTris—HCl pH 9.4的聚丙烯管内进行中和。
8.采用ELISA模式,用纯化抗体来检测噬菌体—多肽或抗原。
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