SP6 RNA聚合酶

英文名称：SP6 RNA Polymerase
其他名称：SP6核糖核酸聚合酶
分子量：单体约98kDa
来源：大肠杆菌细胞，含有编码相应RNA聚合酶的克隆基因
浓度：20u/ul（≥100U/ul，HC）
活力定义：是指在37℃、60分钟内将1nmol AMP合成掺入到寡聚核苷酸片段（DE-81）光吸收形式）所需的酶量
酶活性分析混合物：40mM Tris-HCL（PH8.0）, 10mM DTT, 6mM MgCL2, 2mM 亚精胺，0.5mM 各种NTP, 0.6MBq/ML（3H）.-ATP和20ug/ml含有相应启动子序列的质粒DNA
保存缓冲：每种聚合酶保存于50mM Tris-HCL（PH8.0）, 5mM DTT, 0.1mg/ml BSA,150mM NaC1, 0.5mM ELUGENT去污剂和50%（V/V） 甘油
5×转录缓冲液：200mM Tris-HCL（PH9.0,25℃）, 30mM MgCL2, 50mM DTT, 50mM NaC1和10mM 亚精胺
抑制剂：金属螯合剂，当NaC1或KC1浓度高于150mM（SP6和T7 RNA聚合酶）时，酶活性降低超过50%，硫酸铵可使酶活性降低超过50%
失活：加入EDTA或者70℃加热10分钟
质量控制：相关测试表明无内切或外切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶污染
功能测试：体外转录反应
特点：合成掺入特殊核苷酸，如氨基-、*-、荧光素-、地高辛-标记的核苷酸
性状：液体,SP6核糖核酸聚合酶是一种依赖DNA的聚合酶，对SP6启动子序列表现高度专一性。用该酶合成RNA，仅能以SP6 DNA或克隆在SP6 启动下游的DNA作为合成模板。该酶能以32P，35S及3H标记的核苷三磷酸为底物
用途：科研、实验。合成标记和未标记的RNA，用于杂交、体外RNA翻译；作为RNA、siRNA、RNase酶切保护分析的底物以及基因组DNA测序的模板；研究RNA的二级结构和RNA-蛋白质相互作用、RNA剪接；标记的RNA探针合成，用于印迹实验、原位杂交、microarray杂交
保存：-20℃

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