293和293T的区别以及培养条件

【资料简介】

1、来源：293细胞是转染腺病毒E1A基因的人肾上皮细胞系，293T细胞由293细胞派生，同时表达SV40大T抗原，含有SV40复制起始点与启动子区的质粒可以复制。用Ca3（PO4）2转染效率可高达50%。蛋白表达水平高，转染后2-3天用碱性磷酸酶分析可较 容易地检测到表达的蛋白。瞬时转染293T细胞是过表达蛋白并获得细胞内及细胞外（分泌的或膜）蛋白的便捷方式。

2、形态为上皮细胞，贴壁细胞，能致瘤。

3、染色体核型：亚三倍体人细胞系。染色体众数为64，30%的细胞有64 条染色体。4.2%的细胞染色体数目更多。多数细胞der（1）t（1;15） （q42;q13）, der（19）t（3;19） （q12;q13）, der（12）t（8;12） （q22;p13）,还有四条标记染色体，有的细胞另有5条标记染色体。der（1）与M8 （or Xq+）常常成对出现。N17 与 N22各有四条。值得注意的是多数细胞有三条X染色体，两条Xq+，一条Xp+。

4、293细胞系是原代人胚肾细胞转染5型腺病毒（Ad 5） DNA的永生化细胞。表达转染的腺病毒5的基因。早期报道认为此细胞含有Ad 5基因组左端和右端[RF32764]，现已清楚仅含有左端序列，此细胞系人腺病毒滴度高。室温不贴壁，37℃几日后重新贴壁。表达由整合素beta-1 亚基与玻基结合素受体 alpha-v 亚基组成的玻基结合素细胞表面受体。

5、293:弃培养基，含0.25% *, 0.03% EDTA 消化液洗涤，弃去，加1-2ml消化液室温或37℃消化。加入新鲜培养基，吸出，分到新培养皿中。一传二至一传四。

293T:生长快，通常倍增时间不到一 天 。每3~4 天1：10至1：20稀释，5% CO2条件下培养。细胞贴壁疏松，可只用EDTA消化，不要用*过度消化。

每两到三天换 液一次。

6、冻存液：95%培养基；5%,DMSO；

7、培养条件：ATCC培养基：90%的MEM Eagle，加入2mM L-*，1.5g/L*，0.1 mM必需氨基酸，1.0 mM 丙酮酸钠；10%加热灭活的马血清37℃培养。