溴酚蓝配置方法说明

【资料简介】

溴酚蓝一种pH 指示剂，在pH 3.0~4.6范围，颜色由黄变蓝。常用做电泳指示染料，凝胶中电泳迁移速度在小分子核酸或蛋白质区域。

 

溴酚蓝从乙酸及丙酮混合液中析出者为长六角形棱柱状结晶。近似黄色或浅玫瑰色结晶性粉末，微溶于水及乙醚，溶于乙醇或稀碱液及氨液中呈蓝色。PH变色范围 3.0（黄）~4.6（蓝紫） 微溶于水，易溶于甲醇、乙醇和苯，可自由溶于氢氧化钠溶液，同时形成溴酚蓝钠盐水溶液。

 

溴酚蓝是pH指示剂，pH=3.0时呈黄色，pH=4.6时呈蓝紫色。酸碱指示剂；非水滴定用指示剂，蛋白电泳染色；病毒化验等。 将*磺酰酞悬浮于醋酸中，然后徐徐加入溴，并使溴过量，在搅拌下，于50℃进行反应而得溴酚蓝。

 

溴酚蓝有3种配置方法：

1、1%的溴酚蓝：将托盘天平上称取1g溴酚蓝定溶于100ml无水乙醇中，转移入滴瓶中，贴标签备用。

2、0.05%的溴酚蓝 ：配western blot用的2*SDS上样缓冲液需要用到0.1%的溴酚蓝，2-DE中溴酚蓝一般也是配成0.1%母液。实际上，溴酚蓝在水中的溶解度不高，直接将0.1g溴酚蓝溶于100ml水是有困难的。下面是其较合适的配制方法： 0.05%的溴酚蓝配制方法：取溴酚蓝0.1g，加0.05mol/L氢氧化钠溶液3.0ml使溶解，再加水稀释至200ml，即得。 变色范围pH2.8～4.6（黄→蓝绿）。只是不知道加入NaOH会不会影响2-DE实验。估计影响不大，因为指示剂用量毕竟很少。

3、1％溴酚蓝 ：加1g水溶性钠型溴酚蓝于100ml水中，搅拌或涡旋混合直到*溶解。溴酚蓝其钠盐易溶解在水里。