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上皮细胞株常见问题解析
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关 键 词 | 上皮细胞株 |
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上皮细胞株常见问题解析
一、为什么培养基中可以省去酚红?
酚红在培养基中被用来作为pH值的指示剂,研究表明,酚红可以模拟固醇类激素的作用(特别是雌激素),为避免固醇类反应,用无酚红培养基。二、在新鲜培养基中添加了血清和抗生素后,有效期是多长?
一旦您在新鲜培养基中添加了血清和抗生素时,您应该在两到三周内使用它。因为一些抗生素和血清中的基本成分在解冻后就开始降解。
三、如何选用培养基?
选择培养基没有一定标准,有几点建议可供参考:
建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞的培养基。可以查阅文献,或在购买细胞株时咨询。
本单位惯用的培养基不妨一试,许多培养基可以适合多种细胞。
根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。如小鼠细胞株多选1640;进行细胞杂交、基因转移实验,可选择IMDM。
用多种培养基培养目的细胞,观察其生长状态,可以用生长曲线、集落形成率等指标判断,根据实验结果选择*培养基,这是zui客观的方法,但比较繁琐。
四、选择便宜的培养基品种成本就低吗?
通常,培养基可以适合多种细胞,细胞也可以在不同培养液中生长;例如在MEM中培养的细胞,很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。
培养基养份不同会导致细胞生果不同,病毒或蛋白表达不同,应该选择效果的培养基,考虑生物制品的综合成本;
zui终目的是追求生物制品的得率——得率高则成本低。
五、细胞生长质量很好,为什么病毒、蛋白表达量没有提高?
细胞生长质量高是高表达的必要条件。
采用细胞的疫苗是体外培养一定量的动物细胞并接种病毒,利用病毒在细胞内增殖,得到预期的病毒抗原,然后制成疫苗。细胞生长质量包括细胞密度和形态,没有好的细胞生长质量就不可能有高的表达量。
但要注意的是,细胞生长质量好、密度厚度大时候病毒接种量也应该相应增大,表达量才会提高,否则前期的高质量细胞培养就可能浪费了。
同时病毒、蛋白的表达、分泌在一定浓度下可能会饱和,因此如欲获得高表达,还须研究合适的收液时间和次数。
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