培养基生产和使用常见问题

【资料简介】

1.低血清培养基能用肉眼判断其pH值吗？
答：低血清培养基中酚红的含量与普通培养基中的酚红含量不同，不能通过肉眼观察或通过经验来判定pH值，建议使用pH计进行测定。
2.*溶液和*的配制方法是什么？
答：以0.2mol/L的 L-*配制为例：称取L-*2.92g，加注射用水100ml，充分搅拌混匀。用0.2μm滤膜正压过滤除菌。溶液应在4℃下避光保存，2周内使用。以7.5% NaHCO3的配制为例：称取NaHCO37.5g溶于100ml蒸馏水中过滤除菌。
3.什么培养基中可以省去加酚红？
答：酚红在培养基中用作pH值的指示剂：中性时为红色，酸性时为黄色，碱性时为紫色。酚红本身对生物制品质量并不会产生影响，可以通过纯化技术去除，但酚红在无血清培养基可能带来胞内钠/钾失衡，影响细胞生长，当然这种作用能被血清所中和或减轻。酚红并不是培养基中必需的一种成分，很多国外的疫苗或抗体生产企业在生产过程中都使用无酚红培养基。
4.放置在冰箱中的培养基颜色会发生变化，为什么？
答：培养基保存于4℃冰箱中，培养基内CO2 会逐渐溢出，造成培养基越来越偏碱性。而培养基中酸碱指示剂（通常为phenol red）的颜色也会随碱性增加而更偏暗红。培养基偏碱后再用于细胞培养将造成细胞生长停滞或死亡。培养基偏碱时，可以通入无菌过滤的CO2，以调整pH值。