胆酸（CA）检测试剂盒测定

【资料简介】

胆酸(CA)检测试剂盒抗原修复方法 
常用抗原修复液：柠檬酸缓冲液（0.01M pH6.0）、EDTA 抗原修复液（pH8.0 或
9.0）等等。 
一、酶消化修复法 
切片脱蜡水化处理，TBS 冲洗，在组织上滴加或，37℃孵育
20~30min 后 TBS 冲洗即可。 
二、微波抗原修复法 
微波盒中加入抗原修复液微波加热至沸腾，将脱蜡水化后的切片置于耐高温塑料
切片架上，放入已沸腾的缓冲液中，中档继续微波 10~15min，取出微波
盒冷却至室温后，自来水冲洗，取出切片。因不同微波炉微波处理时间存在差异，
须自行调整。 
三、直接高压抗原修复法 
取修复液于不锈钢高压锅中加热至沸腾，将组织切片置于耐高温切片架上，修复
液沸腾后放入切片架，盖上锅盖，待喷气后计时 1.5~2.5min 即可脱离热源，自
然冷却至室温后自来水冲洗，取出切片。此方法适用于较难检测或核抗原的修复。
四、隔水式高压抗原修复法 
不锈钢高压锅中加自来水加热至沸腾，微波盒中加入修复液于微波炉中加热至沸
腾，将切片放入微波盒中，再将微波盒放入高压锅中盖上锅盖，待喷气后计时
4~8 min 即可关闭热源，自然冷却至室温后自来水冲洗，取出切片。此方法适用
于较难检测或核抗原的修复。 
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。   
4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。 
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.
10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.胆酸(CA)检测试剂盒测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。