抗乙酰*受体抗体自身抗原

【资料简介】

1．定义 乙酰*受体（AChR）是一种膜离子通道的低聚物。乙酰*由运动神经末梢释放结合至AChR两个。亚单位上，使*通道打开，允许阳离子顺化学梯度弥散至肌肉，产生终板电位，在MG患者中抗乙酰*受体的抗体使终板的乙酰*受体数减少，但由于终板电位通常较阈电位要高，AChR中度减少不会引起临床症状。终板电位高于阈电位的程度随种类明显不同，并在不同个体肌肉内也相差很大，可能导致重症肌无力（MG）的不同临床表现。神经肌肉递质的传递的解剖学及生理学在此不详细的讨论。
2．结构及来源 AChR有五个亚单位α2，β，δ，ε构成一个*孔道。正常成人肌肉AChR局限在终板的突触后膜；正常健康成人的肌肉提纯AChR，只有0．3 pm01／g的得率。在胎儿肌肉或原代培养的肌细胞中AChR可在整个成肌细胞及肌管内检测到。随着肌纤维发育成熟、肌细胞受神经支配，AchR逐渐局限于终板区域，随后γ亚单位被ε取代。在人类，胎儿型AchR在妊娠33周时被成人型取代，而啮齿动物这种转变是在出生后进行。如果去神经支配发生在成熟后，则虽然终板处乙酰*受体密度仍很高，但丁亚单位会再次出现在肌纤维的表面。因此，胎儿及去神经支配的肌肉可用于纯化AChR。
胸腺髓质中含有类肌细胞，名为“myoid”。myoid能表达胎儿型AchR，在胎儿及新生儿胸腺中zui常见，但也可在成人的胸腺中找到。它们在重症肌无力病因学上的作用尚未阐明。
人类肌细胞AChR可从手术后标本中获得，天然肌细胞膜部分可用相同容量的2％TritonXl00抽提获得，在抽提物中需加入苯甲基双乙磺丙烷氟化物和其他蛋白水解酶抑制剂，4℃时可保存1～2周，在一70℃时可保存几个月。
3．纯化 AchR对a-BuTx的高亲和力和特异性确保了检测的特异性和敏感性，因此不需要做抗原纯化。抽提时用2—3nM125I-α-BuTx （比活必须在3000／mrn01）作亲和剂。要注意的是，如果用仅表达删L型AchR的细胞作为原料，成人型AChR特异性自身抗体容易漏检，可能导致阴性结果增加7％。
4．序列特性 AChR的基因首先是从一些鱼类的发电器官中克隆出来并测得序列，目前已经克隆出许多物种包括人类的AChRcDNA。个体间的亚单位有显著的相似性，且不同物种间也有较多的同源性。然而，抗原表位却有显著差异，因而用人类或灵长类的乙酰*受体作为抗原来作免疫测定诊断*。