人布鲁氏菌（Brucellosis）说明书定性

【资料简介】

人 布鲁氏菌（Brucellosis）酶联免疫分析试剂盒使用说明书

本试剂盒仅供研究使用。
                                                                                                                                          96T  使用目的：
本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中布鲁氏菌（Brucellosis）表达。
实验原理 实验原理 实验原理 实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人布鲁氏菌（Brucellosis）表达。用纯化的人布鲁氏
菌（Brucellosis）抗体包被微孔板，制成固相抗体，可与样品中布鲁氏菌（Brucellosis）相
结合，经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与 HRP 标记的布鲁氏菌（Brucellosis）抗
体结合，形成抗体抗原酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB 显色。TMB在HRP
酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。用酶标仪在 450nm 波长下测
定吸光度（OD 值），与 CUTOFF 值相比较，从而判定标本中人布鲁氏菌（Brucellosis）的
存在与否。
试剂盒组成  
1  30 倍浓缩洗涤液  20ml×1 瓶  7  终止液  6ml×1 瓶
2  酶标试剂  6ml×1 瓶  8  阳性对照  0.5ml×1 瓶
3  酶标包被板  12 孔×8 条  9  阴性对照  0.5ml×1 瓶
4  样品稀释液  6ml×1 瓶  10  说明书  1 份
5  显色剂A 液  6ml×1 瓶  11  封板膜  2 张    
6  显色剂 B液  6ml×1/瓶  12  密封袋  1 个
标本要求  
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验，可将标本放于20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤 操作步骤 操作步骤 操作步骤
1.  编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照2 孔、空白对照 1
孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）
 
 
2.  加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50'l。然后在待测样品孔先
加样品稀释液 40'l，然后再加待测样品 10'l。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不
触及孔壁，轻轻晃动混匀，
3.  温育：用封板膜封板后置37℃温育 30 分钟。      
4.  配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
5.  洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此
重复 5次，拍干。
6.  加酶：每孔加入酶标试剂50'l，空白孔除外。   7.  温育：操作同 3。
8.  洗涤：操作同 5。
9.  显色：每孔先加入显色剂 A50'l，再加入显色剂 B50'l，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
10 分钟.
10.  终止：每孔加终止液 50'l，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.  测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止
液后 15 分钟以内进行。  
计算和结果判定：

试验有效性：阳性对照孔平均值≥1.00; 阴性对照平均值≤0.10
    临界值（CUT OFF）计算：临界值=阴性对照孔平均值+0.15
    阴性判定：样品OD 值<  临界值（CUT OFF）者为布鲁氏菌（Brucellosis）阴性
    阳性判定：样品OD 值≥  临界值（CUT OFF）者为布鲁氏菌（Brucellosis）阳性
。  
注意事项 注意事项 注意事项 注意事项 1．操作严格按照说明书进行，本试剂不同批号组分不得混用。
2．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 1530 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未
用完，板条应装入密封袋中保存。
3．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
4． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
5．底物请避光保存。
6．试验结果判定必须以酶标仪读数为准，使用双波长检测时，参考波长为 630nm
7．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为 2M 的硫酸，使用时必须
注意安全。
保存条件及有效期 保存条件及有效期 保存条件及有效期 保存条件及有效期
1．试剂盒保存：；28℃。
2．有效期：6个月 
 

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