简单介绍细胞划痕试验

【资料简介】

细胞划痕法是简捷测定细胞迁移运动和修复能力的方法，类似体外伤口愈合模型，在体外培养皿或平板培养的单层贴壁细胞上，用微量枪头或其它硬物在细胞生长的中央区域划线，去除中央部分细胞，然后继续培养细胞至试验设定时间，观察周边细胞是否迁移至中央划痕区，以此判断细胞的生长迁移能力。试验通常需设定对照组和供试品组，通过不同分组之间的细胞对于划痕区修复能力的不同可以判断供试品迁移与修复能力。

适用对象：包括加了某种处理因素、药物、重组蛋白、外源性基因、生长因子等供试品。

试验示例

1. 试验材料

2. 试验步骤

1）用marker笔比着直尺在6孔板背后每孔横向和纵向各三等份划线做记号，将细胞按照5×105cell/孔接种，加入10%CS的DMEM培养液培养24h，使形成单层细胞；

2）细胞培养结束后用10μL枪头比着直尺对准孔板，轻推横向、纵向划线形成划痕，用PBS漂洗细胞3次，去除划掉的细胞；

3）在对照组和供试品组孔中分别加入2mL终浓度为0.5mg/mL的无血清培养基配制的人重组胶原蛋白和牛I型胶原蛋白，空白对照组只加入2mL无血清培养基；

4）转移至37℃、5%CO2培养箱中，于0h、24h/48h、72h时，以横向和纵向的交点为核心，在40倍显微镜下拍照；

5）每组3个重复孔，共27个数据；

3. 试验结果