人疱疹病毒 7 型 PCR 试剂盒使用方法

【资料简介】

人疱疹病毒 7 型 PCR 试剂盒

【产品名称】

商品名称：人疱疹病毒 7 型 PCR 试剂盒

Name ：Human Herpesvirus-7 (HHV-7) PCR Kit

【包装规格】50 次/盒

【产品及特点】

人疱疹病毒 7 型(Human Herpesvirus-7,HHV-7)是从淋巴增生性疾

病和艾滋病患者淋巴细胞中培养获得的一种新病毒，可通过唾液飞沫及密

切接触（如接吻，共用餐、饮器具等）、输血传播。除免疫低

下（如先天性免疫缺陷、艾滋病、长期服用免疫抑制剂等）外，绝大多数

人感染后终身都不会产生明显症状；免疫低下者，如 HIV 感染者，当人

体特异性免疫被削弱至一定程度时， 潜伏的病毒可被激活并产生急性感

染症状，此时会出现间质性肺炎、脑炎、脑膜炎、肝炎及多器官衰竭等症

状，活化的病毒可大规模感染 T 淋巴细胞，使免疫功能进一步削弱，该

病毒对人体健康有较大影响，因此检测人疱疹病毒 7型 DNA 具有重要意

义。本产品就是根据 PCR 原理开发的、检测此病毒的试剂盒。本产品具

有下列特点：

1.即开即用，用户只需要提供病毒 DNA 模板。

2.引物经过精心优化，专一性强，只扩增人疱疹病毒7 型病毒 DNA，与

其他病毒没有交叉反应。

3.提供阳性对照，便于区分假阴性样品。

4.PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。

5.本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次，但只能用于科研。

【规格及成分】

成 份 编号 十孔盒包装

PCR MagicMix 3.0 63981 1 mL（红盖）

超纯水 109350 1 mL（亮黄色）

人疱疹病毒 7型 PCR 引物混合液 3026yw 100 μL（白盖）

人疱疹病毒 7 型 PCR 阳性对照

（1×10E8 拷贝/μL）

93981-3026pc 50 μL（黄盖）

【运输及保存】

低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。人疱疹病毒 7 型 PCR 阳性对

照需要单独放置，不要污染其他试剂。

【自备试剂】

样品 DNA。

【使用方法】

一、样品 DNA 的制备

用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA

提取试剂盒兼容。

2.如果有 N 个样品，则需做 N+2 个提取，包括一个样品制备阳性对照和

一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是人疱疹病毒7 型 PCR 阳性

对照的 1000 倍稀释液，其总体积等于试剂盒所需的样品量，样品制备阴

性对照是直接用水。

二、设置 PCR 反应（40μL 体系）

3.对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴

性对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成

分：

成分

N+2 个

样品管

PCR 阴性

对照

PCR 阳性

对照

PCR Magic Mix 3.0 各 20 μL 20 μL 20 μL

人疱疹病毒 7 型通用 PCR 引物混

合液

各 2 μL 2 μL 2 μL

N+2 个样品 DNA 模板 各 18 μL - -

PCR 阴性对照（水） - 18 μL -

PCR 阳性对照（人疱疹病毒 6 型通

用 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释

液）

- - 18 μL

4.按下表设置 PCR 反应: 过程 温度 时间

预变性 95℃ 5 min

PCR 反应

（35 个循环）

95℃ 15 sec

55℃ 15 sec

72℃ 30 sec 最后延伸 72℃ 10 min 三、电泳检测

5.取 5μL PCR 产物电泳进行检测。本产品提供的 PCR Mix 在扩增结束

后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。预期的 PCR 产物长

度为 481bp。阳性对照必须有此条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否

则实验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增

以排除 PCR 抑制剂的感染。