无菌试验培养基使用方法及其特点

【资料简介】

无菌培养基品种

• 一  硫乙醇酸盐培养基
• 二  酪胨琼脂培养基
• 三  葡萄糖蛋白胨汤培养基（改良马丁肉汤培养基）
• 无菌检验培养基概述
• • 无菌检验培养基是生物制品检验的基础物质也是常用的物质，质量稳定性直接关系到疫苗的质量。
  • 无菌检验培养基根据不同制品还可能和其它培养基共同使用。这都很正常。
  • 无菌检验培养基标准比较完善。

硫乙醇酸盐培养基配方

•    酪胨                                      15g
•    葡萄糖                                     5g
•    L-半胱盐酸盐                             0.5g
•    酵母粉                                     5g                 
•    硫乙醇酸钠                               0.5g
•    琼脂                                     0.7g
•    氯化钠                                   2.5g
•    刃天青                                 0.001g

硫乙醇酸盐培养基配方特点

• 酪胨、L-半胱盐酸盐、酵母粉为微生物提供氮源营养物质。
• 葡萄糖为微生物提供碳源。
• 氯化钠等为微生物提供无机盐保证渗透压平衡的目的。
• 琼脂加量比较少，因此此培养基呈流体状。目的是：1.观察方便。2.控制氧气进入速度。
• 硫代乙醇酸钠是氧化剂，和氧气反应有利于创造厌氧环境。
• 刃天青加入为了观察氧气情况。

硫乙醇酸盐培养基使用特点

• 此培养基可用于需氧和厌氧菌检验。
• 含琼脂的培养基用于血清制品及澄清度较好的疫苗无菌检验。
• 不含琼脂硫代乙醇酸盐培养基用于浑浊制品检测。
• 红色层不超过1/3，如超过需要加热驱氧，但不得重复驱氧。

硫乙醇酸盐培养基使用常见问题

• 透明度不好，有漂浮物或者沉淀物，如沉淀物可能和酪胨等含氮物质有关。如为漂浮物可能和琼脂有关。
• 红色层不明显，主要和刃天青品种加量有关。现在有的培养基制作后为蓝色层。这也是正常情况。
• 灵敏度的问题可能和菌种传代、稀释有关。
• 灭菌后放置出现褐色物质，主要和灭菌方式有关。

酪胨琼脂培养基配方

•    酪胨                                     15g
•    葡萄糖                                    5g
•    L-半胱盐酸盐                            0.5g
•    酵母粉                                    5g               
•    琼脂                                     12g
•    氯化钠                                  2.5g

酪胨琼脂培养基配方特点

• 酪胨、L-半胱盐酸盐、酵母粉为微生物提供氮源营养物质。
• 葡萄糖为微生物提供碳源。
• 氯化钠等为微生物提供无机盐保证渗透压平衡的目的。
• 琼脂加量加大，制成固体培养基。
• 不需要加硫代乙醇酸钠。
• 不需要加刃天青。

酪胨琼脂培养基使用特点

• 此培养基只能用于需氧菌检验。
• 现在有些细菌疫苗为活疫苗，此培养基有利于纯粹检测。
• 不加硫代乙醇酸钠，不需要驱氧。
• 刃天青指示用，也不需要加。

酪胨琼脂养基使用常见问题

• 透明度不好，有沉淀物。沉淀物可能和酪胨等含氮物质有关。
• 强度过软、过硬都不好。这主要和琼脂品种加量有关。需要提前做强度试验。
• 复溶性不好。这主要和琼脂种类有关。

改良马丁肉汤培养基配方

•    蛋白胨                                    20g
•    葡萄糖                                     5g
•    酵母粉                                    2.5g               
•    *                                 1g
•    *                                    0.5g
•    琼脂                                      0.3g

改良马丁肉汤培养基配方特点

• 蛋白胨、酵母粉为微生物提供氮源营养物质。
• 葡萄糖为微生物提供碳源。
• *及*有利于真菌细菌繁殖。
• 琼脂加入便于观察。

改良马丁肉汤培养基使用特点

• 此培养基只能用于真菌及霉菌检验。
• 培养是温度为25℃和37 ℃两组培养。
• 加琼脂有利于观察。

改良马丁肉汤培养基使用常见问题

• 透明度不好，有沉淀物。沉淀物可能和酪胨等含氮物质有关。
• 透明度还有可能和磷酸盐有关。
• 生长不好，有时和水的pH值有关。因为此培养基为自然pH，工艺用水pH应在5.5-6.5之间比较合适。