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elisa试剂盒,人elisa试剂盒操作方法
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- 【资料简介】
elisa试剂盒,人elisa试剂盒操作方法
ELISA 是一种敏感性高、特异性强、重复性好的实验诊断方法。ELISA 试剂盒操作方法,Elisa试验广泛应用在免疫学检验的各领域中,那么Elisa试验有没有简单便捷的操作方法呢?
人ELISA试剂盒操作方法:用于检测未知抗体的间接法
1.用包被缓冲液将已知抗原稀释至 1~10μ g/ml,每孔加 0.1ml,4℃过夜。次日洗涤 3 次。
2.加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml 于上述已包被之反应孔中,置 37℃孵育 1 小时, 洗涤。 (同时做空白、阴性及阳性孔对照)
3.于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml,37℃孵育 30-60 分钟,洗涤, zui后一遍用 DDW 洗涤。
4.于各反应孔中加入临时配制的 TMB 底物溶液 0.1ml,37℃ 10~30 分钟
5.于各反应孔中加入 2M 硫酸 0.05ml 6.可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为 无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”“-”号表示。也可测 OD 值:在 ELISA 检测 、 仪上,于 450nm(若以 ABTS 显色,则 410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔 OD 值, 若大于规定的阴性对照 OD 值的 2.1 倍,即为阳性。
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