免费代测人颗粒溶素ELISA检测试剂盒

【资料简介】

人颗粒溶素ELISA检测试剂盒

试验原理：
　　　　GNLY试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知GNLY浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将GNLY和*标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中GNLY的浓度呈比例关系。

自备材料
蒸馏水。
加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
振荡器及磁力搅拌器等。

安全性
避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

人颗粒溶素ELISA检测试剂盒

操作注意事项
试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

样品收集、处理及保存方法
血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液
保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

人颗粒溶素ELISA检测试剂盒

操作步骤
使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。
根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。
加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的*标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。
甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。
取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。
在450nm波长处测定各孔的OD值。

局限
6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到的结果。

试剂盒性能
1. 灵敏度：zui小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性：不与其它细胞因子反应。
3. 重复性：板内、板间变异系数均小于10%。

人颗粒溶素ELISA检测试剂盒

结 果 判 断 与 分 析
1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值
2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的GNLY标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的GNLY含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。
3、检测值范围：0-80ng/ml
4、敏感度： 0.1 ng/ml3-（3,4-Dihydroxyphenyl）-2-methyl-L-alanine 左旋* [41372-08-1] 100g
Dihydroxypropyl theophylline 二羟丙* [479-18-5] 100g
4,6- Dihydroxypyrimidine 4, 6 - 二羟基嘧啶 [1193-24-4] 500g
Dithiooxamide 二硫代乙酰胺 [79-40-3] 5g
Dithizone 铅试剂 [60-10-6] 50g
DNA Native E.coli / 10mg
3,5-Dihydroxytoluene, monohydrate 3,5-二羟基甲苯一水 [6153-39-5] 5g
3,5-Diiodo-L-tyrosine, dihydrate 3,5-二碘-L-*二水物 [18835-59-1] 25g
Diisooctylamine 二异辛胺 [106-20-7] 100ml
N,N′-Diisopropylcarbodiimide （DIC） N,N'-二异丙基碳酰亚胺 [693-13-0] 100g
Diisopropyl ether 异丙醚 [108-20-3] 250ml
N,N-Diisopropylethylamine （Hünig’s base’, N-Ethyldiisopropylamine, DIPEA） N，N-二异丙基乙胺（N-乙基二异丙胺） [7087-68-5] 500ml
Dimenhydrinate * [523-87-5] 100g
2,3-Dimercapto-1-propanesulfonic acid, sodium salt, monohydrate 2,3-二巯基丙烷磺酸钠盐一水 [207233-91-8] 100g
2,3-Dimercapto-1-propanol 二巯基丙醇 [59-52-9] 100ml
3,4-Dimethoxybenzaldehyde 藜芦醛 [120-14-9] 500g
1,3-Dimethoxybenzene 间苯二甲醚 [151-10-0] 250ml
1,4-Dimethoxybenzene 对二甲氧基苯 [150-78-7] 5g
3,3’-Dimethoxybenzidine, dihydrochloride 3,3 -二甲氧基联苯胺盐酸盐 [20325-40-0] 100g
Flunixin meglumine 氟尼辛* [42461-84-7] 100g
9-Fluorenone-4-carboxylic acid 9-芴酮-4-甲酸 [6223-83-2] 25g
Fluorescein, free acid 荧光素 [2321-07-5] 100g
DTAC 十二烷基 -*基氯化铵 [112-00-5] 250g
3,5-Dimethoxybenzoic acid 3,5-二甲氧基苯甲酸 [1132-21-4] 250g
2,7-Dimethoxynaphthalene 2,7-二甲氧基萘 [3469-26-9] 100g
N,N-Dimethylacetamide N’,N-二甲基乙酰胺 [127-19-5] 250ml
6-Dimethylallylaminopurine 6-（异戊烯基氨基）嘌呤 [2365-40-4] 1g
6-Dimethylallylamino purine riboside （2iP Riboside） 6-（γ,γ-二甲基烯丙基氨基）嘌呤核苷 [7724-76-7] 100mg
Dimethylamine hydrochloride 二甲胺盐酸盐 [506-59-2] 500g
4-（Dimethylamino）-benzaldehyde 4-（二甲氨基）苯甲醛 [100-10-7] 100g
5-（p-Dimethylaminobenzal） rhodanine 玫瑰红银试剂 [536-17-4] 25g
2-（Dimethylamino）ethyl methacrylate 甲基丙烯酸二甲氨乙酯 [2867-47-2] 100g