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48T人白细胞介素-2检测试剂盒实验原理
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| 关 键 词 | 人白细胞介素-2检测试剂盒 | ||
- 【资料简介】
上海信燃科技发展有限公司专业供应葡聚糖凝胶HL-20,白介素elisa试剂盒,肿瘤坏死因子elisa试剂盒,人类白介抗原B27,细胞生长因子试剂盒,提供免费代测服务,保证实验结果客观真实性。我公司对试剂盒质量100%保证,若存在质量问题,我们无条件包退换人白细胞介素-2检测试剂盒
用 途:
人IL-2 ELISA试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、缓冲液中细胞上清液及各种体液中的IL-2 。本试剂盒可以检测天然和重组的IL-2 。本试剂盒于科研、而非用于临床诊断。人白细胞介素-2检测试剂盒
试验原理:
人IL-2 试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知IL-2 浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将IL-2 和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中IL-2 的浓度呈比例关系。安全性
1. 此试剂盒的人血制品中的HbsAg、和抗HIV为阴性,但没有实验室可*保证此血制品不会传染肝炎、AIDS或其它传染病,依据当地的安全条例处理本试剂盒里的成份及血清和血浆等样品。
2. 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
3. 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
4. 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。人白细胞介素-2检测试剂盒
操作注意事项
1. 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2. 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3. 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4. 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
5. 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6. 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7. 底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8. 加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9. 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法
1、 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2、 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、 保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。人白细胞介素-2检测试剂盒
操作步骤
1. 使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。
3. 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
4. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作四次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5. 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作四次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育15分钟。避免光照。
8. 取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9. 在450nm波长处测定各孔的OD值。
6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到的结果。人白细胞介素-2检测试剂盒
试剂盒性能
1. 灵敏度:zui小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性:不与人其它细胞因子反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。
Agarose M 琼脂糖M [9012-36-6] 250g
Azure B 天青B [531-55-5] 100g
AMP disodium, hexahydrate ;Adenosine-5’-monophosphate, disodium, hexahydrate 5’-单磷酸腺苷二钠盐六水 [4578-31-8] 25g
ATP disodium salt, trihydrate; Adenosine 5’-triphosphate, disodium salt, trihydrate 5’-三磷酸腺苷二钠盐三水 [51963-61-2] 5g
ATP disodium salt, trihydrate; Adenosine 5’-triphosphate, disodium salt, trihydrate 5’-三磷酸腺苷二钠盐三水 [51963-61-2] 25g
ATP Solution(100mM) ;Adenosine 5’-triphosphate solution 100mM 5’-三磷酸腺苷二钠溶液(100mM) / 0.25ml
S-Adenosyl-L-methionine S-腺苷甲硫氨酸 [29908-03-0] 5g
Adipic acid 己二酸 [124-04-9] 500g
4-(2-Aminoethyl)benzenesulfonyl fluoride,hydrochloride 4-2-胺乙基苯磺酰氟盐酸盐 [30827-99-7] 50mg
3-Amino-9-ethylcarbazole 3-氨基-9-乙基咔唑 [132-32-1] 25g
AEC Stain Kit / 5 preps
Aflatoxin B1 from Aspergillus flavus 黄曲霉毒素B1 [1162-65-8] 5mg
Aflatoxin B2 黄曲霉毒素B2 [7220-81-7] 1mg
Azure C 天青C [531-57-7] 25g
Barbituric acid 巴比妥酸 / 25g
Alginic acid 海藻酸 [9005-32-7] 250g
Alloxan, monohydrate 阿脲 [2244-11-3] 5g
Climbazol 甘宝素 [38083-17-9] 500g
Dexamethasone 地塞米松 [50-02-2] 5g
Direct red 80 天狼猩红 [2610-10-8] 25g
DTAC 十二烷基 -*基氯化铵 [112-00-5] 50g
Erythrosin B, sodium salt 藻红B [568-63-8] 25g
Brilliant green 灿烂绿 [633-03-4] 100g
Aniline blue,alcohol soluble 苯胺蓝醇溶 [8004-91-9] 25g
Aniline blue, water soluble 苯胺蓝(水溶) [28631-66-5] 25g若需要了解试剂盒的详细信息,请:地址:上海市莘浜路35弄1号501室
:200070
:谢
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