荧光素标记血管内皮生长因子A抗体IgG相关知识

【资料简介】

荧光素标记血管内皮生长因子A抗体IgG相关知识

加一抗与抗原结合
①将加样槽洗涤干净，将膜用一次性手套覆盖好，按标记和实验设计切下膜条并作好记号，按顺序置于加样槽中加入相应的一抗约1ml，注意保证膜的所有部分同溶液接触。
②室温下于摇床孵育2h或4℃过夜。
③弃去一抗，膜条仍置于加样槽，每个槽中的膜用PBST在摇床洗涤洗涤5min左右 ，换液，反复4-5次。

加二抗与一抗的结合
① 根据实验需要和设计选择合适的酶标二抗和稀释浓度（PBS稀释），每个加样槽中加入二抗1ml左右室温下于摇床孵育1h，注意保证膜的所有部分同溶液接触。
②弃去二抗，膜条仍置于加样槽，每个槽加PBST在摇床洗涤洗涤5min左右，换液反复4-5次。

显色反应（重组蛋白一般用AP显色或是DAB显色，裂解液一般用发光法）
① HRP标记二抗用DAB显色，按顺序依次将DAB三种剂各取3滴于5ml蒸馏水中，避光混匀，将膜加入显色液中避光显色5-15min终止反应，对照Marker记录实验结果，将NC膜晾干扫描保存
②        AKP标记二抗用AP显色，在10mlAKP缓冲液中加入66µlNBT溶液和33µl BCIP溶液混匀，室温下将膜放入显色（37℃可加速反应）5-15min。对照Marker记录实验结果，将NC膜晾干扫描保存。
③底物发光法：将两种显色底物1：1等体积混合后将其覆盖在膜表面使其均匀，用玻璃胶片把膜包起来，马上在暗室中将X光片覆盖在膜的上面（时间根据光的亮度来衡量），显影、定影。（荧光在一段时间后会越来越弱要控制好时间）

Anti-VEGF-A/FITC  荧光素标记血管内皮生长因子A抗体IgG

Anti-VEGF-B/FITC  荧光素标记血管内皮生长因子B抗体IgG

Anti-VEGF-C/FITC  荧光素标记血管内皮生长因子C型抗体IgG

Anti-VEGF/RBITC  罗丹明标记VEGF抗体IgG

Mouse Anti-human VEGF/FITC  荧光素标记小鼠抗人VEGF单克隆抗体IgG

Anti-VEGFR1/VEGF-R1/Flt-1 /FITC  荧光素标记血管内皮生长因子受体1抗体IgG

Anti-VEGFR2（VEGF-R2）Flk1/FITC  荧光素标记血管内皮生长因子受体2抗体IgG

Anti-SV2A/FITC  荧光素标记突触泡蛋白2A抗体IgG

Anti-sVEGFR2/sFLK-1/FITC  荧光素标记可溶性血管内皮生长因子受体2抗体（人）IgG

Anti-VEGFR-3/FLt-4 /FITC  荧光素标记血管内皮细胞生长因子受体-3IgG

Anti-HSP-70/RBITC  罗丹明标记热休克蛋白-70抗体IgG

Anti-VHL/FITC  荧光素标记一种肿瘤抑制因子抗体IgG

Anti-Vimentin/FITC  荧光素标记波形蛋白抗体IgG

Anti-VIP/FITC  荧光素标记血管活性肠肽抗体蛋白抗体IgG

Anti-Visfatin-1/PBEF1（NT）/FITC  荧光素标记内脂素/内脏脂肪素/腹脂素/内肥素 抗体IgG

Anti-Visfatin-1/PBEF1（NT） hu、 mo、 rat、MK /FITC  荧光素标记内脂素/内脏脂肪素（N端抗体）IgG

Anti-Visfatin-1/PBEF1（NT） Human /FITC  荧光素标记内脂素/内脏脂肪素（N端抗体）IgG