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荧光素标记电压依赖性阴离子通道抗体IgG
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上 传 人 | 上海安研商贸有限公司 | 需要积分 | 0 |
关 键 词 | 荧光素标记电压依赖性阴离子通道抗体IgG,荧光素标记电压依赖性阴离子通道抗体IgG,Anti-VDA |
- 【资料简介】
Anti-VDAC/FITC 荧光素标记电压依赖性阴离子通道抗体IgG Anti-CD14/Biotin *化CD14抗体IgG Anti-VEGF/FITC 荧光素标记VEGF抗体IgG Anti-VEGF(Rabbit)/FITC 荧光素标记血管内皮生长因子抗体IgG Anti-VEGF-A/FITC 荧光素标记血管内皮生长因子A抗体IgG Anti-VEGF-B/FITC 荧光素标记血管内皮生长因子B抗体IgG Anti-VEGF-C/FITC 荧光素标记血管内皮生长因子C型抗体IgG Anti-VEGF/RBITC 罗丹明标记VEGF抗体IgG Mouse Anti-human VEGF/FITC 荧光素标记小鼠抗人VEGF单克隆抗体IgG Anti-VEGFR1/VEGF-R1/Flt-1 /FITC 荧光素标记血管内皮生长因子受体1抗体IgG Anti-VEGFR2(VEGF-R2)Flk1/FITC 荧光素标记血管内皮生长因子受体2抗体IgG Anti-SV2A/FITC 荧光素标记突触泡蛋白2A抗体IgG Anti-sVEGFR2/sFLK-1/FITC 荧光素标记可溶性血管内皮生长因子受体2抗体(人)IgG Anti-VEGFR-3/FLt-4 /FITC 荧光素标记血管内皮细胞生长因子受体-3IgG Anti-HSP-70/RBITC 罗丹明标记热休克蛋白-70抗体IgG Anti-VHL/FITC 荧光素标记一种肿瘤抑制因子抗体IgG Anti-Vimentin/FITC 荧光素标记波形蛋白抗体IgG Anti-VIP/FITC 荧光素标记血管活性肠肽抗体蛋白抗体IgG Anti-Visfatin-1/PBEF1(NT)/FITC 荧光素标记内脂素/内脏脂肪素/腹脂素/内肥素 抗体IgG Anti-Visfatin-1/PBEF1(NT) hu、 mo、 rat、MK /FITC 荧光素标记内脂素/内脏脂肪素(N端抗体)IgG SDS-聚丙烯酸胺凝胶电泳(SDS-PAGE)
①根据要求配制好SDS-聚丙烯酸胺凝胶(一般釆用10%的SDS-PAGE)
②将已配制好的凝胶装入电泳仪中(注意不要漏液)。
③设计加样顺序,作好实验记录,按预定顺序加样。一般裂解液我们按10-20ul/道点样,重组蛋白按1-2ug/道点样。
④把电泳装置与电源连接好,将电压调至100V电泳10-20min,待溴酚蓝迁移出积层胶位置再换用200V,30-40min后关闭电源。
⑤从电泳装置上卸下凝胶玻璃板,用水冲洗干净,准备转膜。蛋白质样品(抗原)的制备:
① 细胞的处理方法:向收集到的细胞中加入RIPA裂解缓冲液(三中蛋白酶抑制在使用前加入,终浓度为2ug/ml)在冰上裂解30—60min,然后再插入冰盒进行超声,超声强度以不产生泡沫为准,超声每次2-3秒,重复3-4次,再离心12000rpm3-5min,吸取上清备用。(超声强度不能过大,防止蛋白碳化)
组织的处理方法:按实验要求将组织从动物体内取出(样品不宜反复冻融),取少量(1-2g左右)放入玻璃匀桨器中研磨成匀浆,然后转入EP管中进行超声,超声强度以不产生泡沫为准,超声每次5-7秒,重复5-6次,再离心12000rpm3-5min,吸取上清备用。
②上述两种方法得来的样品处理液还要加入1/4体积左右的上样Buffer,然后放在沸水浴中加热3-4min使蛋白变性,方可作为样品点样。(注意:在加热组织裂解液时,肝脏和肾脏组织要特别注意其本身浓度,是在制作裂解液时就适当稀释,否则加热后会凝结成固态。还有些组织处理后很粘稠,有带丝状物,这是未裂解的核酸,可以适当离心后再用。)
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