上海博研：大鼠尿素氮（BUN）试剂盒说明书

【资料简介】

大鼠尿素氮（BUN）标本要求  
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
大鼠尿素氮（BUN）操作步骤
1.  标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
3200pmol/L  5号标准品  150µl 的原倍标准品加入150µl标准品稀释液
1600pmol/L  4号标准品  150µl 的5号标准品加入150µl标准品稀释液
800pmol/L  3号标准品  150µl 的4号标准品加入150µl标准品稀释液
400pmol/L  2号标准品  150µl 的3号标准品加入150µl标准品稀释液
200pmol/L  1号标准品  150µl 的2号标准品加入150µl标准品稀释液
 
 
2.  加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50µl，待测样品孔中先加样品稀释液40µl，
 
 
然后再加待测样品10µl（样品zui终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽
量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.  温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。      
4.  配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5.  洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此
重复5次，拍干。
6.  加酶：每孔加入酶标试剂50µl，空白孔除外。  
7.  温育：操作同3。
8.  洗涤：操作同5。
9.  显色：每孔先加入显色剂A50µl，再加入显色剂B50µl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
10分钟.
10.  终止：每孔加终止液50µl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.  测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。  测定应在加终止
液后15分钟以内进行。

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