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荧光素标记肺癌肿瘤阻抑基因1抗体IgG,Anti-TSLC1/FITC
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关 键 词 | 荧光素标记肺癌肿瘤阻抑基因1抗体IgG,Anti-TSLC1/FITC,荧光素标记肺癌肿瘤阻抑基因1 |
- 【资料简介】
荧光素标记肺癌肿瘤阻抑基因1抗体IgG,Anti-TSLC1/FITC
1)免疫脾细胞的制备 制备单克隆抗体的动物多采用纯系 Balb/c小鼠。免疫的方法取决于所用抗原的性质。免疫方法同一般血清的制备,也可采用脾内直接免疫法。
2)骨髓瘤细胞的培养与筛选在融合前,骨髓瘤细胞应经过含8-AG的培养基筛选,防止细胞发生突变恢复HGPRT的活性(恢复HGPRT的活性的细胞不能在含8-AG的培养基中存活)。骨髓瘤细胞用10%小牛血清的培养液在细胞培养瓶中培养,融合前24h换液一次,使骨髓瘤细胞处于对数生长期。
3)细胞融合的关键:
1技术上的误差常常导致融合的失败。例如,供者淋巴细胞没有查到免疫应答。这必然要失败的。
2融合试验zui大的失败原因是污染,融合成功的关键是提供一个干净的环境,以及适宜的无菌操作技术。
4)阳性克隆的筛选应尽早进行。通常在融合后10天作*次检测,过早容易出现假阳性。检测方法应灵敏、准确、而且简便快速。具体应用的方法应根据抗原的性质,以及所需单克隆抗体的功能进行选择。常用的方法有 RIA法、 ELISA法和免疫荧光法等。其中ELISA法zui简便,RIA法zui准确。阳性克隆的筛选应进行多次,均阳性时才确定为阳性克隆进行扩增。
5)克隆化克隆化的目的是为了获得单一细胞系的群体。克隆化应尽早进行并反复筛选。这是因为初期的杂交瘤细胞是不稳定的,有丢失染色体的倾向。反复克隆化后可获得稳定的杂交瘤细胞株。克隆化的方法很多,而zui常用的是有限稀释法。Anti-TSLC1/FITC 荧光素标记肺癌肿瘤阻抑基因1抗体IgG Anti-TSLP/FITC 荧光素标记淋巴细胞生成素-1抗体IgG Anti-TTF-1/FITC 荧光素标记甲状腺核转录因子-1/甲状腺特异增强子结合蛋白抗体IgG Anti-TTF-2/FITC 荧光素标记甲状腺转录因子-2抗体IgG Anti-Tubb3/FITC 荧光素标记β微管蛋白-Ⅲ抗体IgG Anti-Tubulin-α/FITC 荧光素标记微管蛋白α抗体IgG Anti-Tubulin-β/FITC 荧光素标记微管蛋白抗体IgG Anti-Tubulin-β/FITC 荧光素标记微管蛋白抗体IgG Anti-β-Actin/HRP 辣根过氧化物酶标记β-肌动蛋白(抗体) Anti-Tubulin-γ/FITC 荧光素标记微管蛋白-γ抗体IgG Anti-VTG/HRP 辣根过氧化物酶标记兔抗鱼、青鳉鱼卵黄蛋白原抗体IgG Anti-Tumstatin/Col4a3/FITC 荧光素标记肿瘤抑素抗体IgG Anti-TWIST protein/FITC 荧光素标记TWIST转录因子蛋白抗体IgG Rabbit Anti-human Fibrinogen/HRP 辣根过氧化物酶标记兔抗人可溶性纤维蛋白原抗体IgG Anti-TY3H/FITC (Tyrosine Hydroxylase ) 荧光素标记*羟化酶抗体IgG Anti-Tyrosinase/FITC 荧光素标记*酶抗体IgG
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