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荧光素标记精子发生相关的新基因抗体IgG相关知识
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关 键 词 | 荧光素标记精子发生相关的新基因抗体IgG,Anti-TSARG7/FITC,荧光素标记精子发生相关的 |
- 【资料简介】
Anti-TSARG7/FITC 荧光素标记精子发生相关的新基因抗体IgG Anti-TSFP1/SP1 /FITC 荧光素标记SP1转录生长因子抗体IgG Anti-tsg101/FITC 荧光素标记tsg101抗体IgG Anti-TSHR/FITC 荧光素标记促甲状腺素受体抗体IgG Anti-TSHR(CT)/FITC 荧光素标记促甲状腺素受体抗体(C端)IgG Anti-TSHR /FITC 荧光素标记促甲状腺素受体抗体IgG Anti-TSHR(NT)/FITC 荧光素标记促甲状腺素受体抗体(N端)IgG Anti-TSLC1/FITC 荧光素标记肺癌肿瘤阻抑基因1抗体IgG Anti-TSLP/FITC 荧光素标记淋巴细胞生成素-1抗体IgG Anti-TTF-1/FITC 荧光素标记甲状腺核转录因子-1/甲状腺特异增强子结合蛋白抗体IgG Anti-TTF-2/FITC 荧光素标记甲状腺转录因子-2抗体IgG Anti-Tubb3/FITC 荧光素标记β微管蛋白-Ⅲ抗体IgG Anti-Tubulin-α/FITC 荧光素标记微管蛋白α抗体IgG Anti-Tubulin-β/FITC 荧光素标记微管蛋白抗体IgG Anti-Tubulin-β/FITC 荧光素标记微管蛋白抗体IgG Anti-β-Actin/HRP 辣根过氧化物酶标记β-肌动蛋白(抗体) Anti-Tubulin-γ/FITC 荧光素标记微管蛋白-γ抗体IgG 免疫检测
一抗与靶蛋白的结合
① 封闭的膜用PBST漂洗2-3次。
② 将加样槽洗涤干净,用蒸馏水润洗,晾干,将膜用一次性手套覆盖好,按标记和实验设计切下膜条(一般为3 mm宽左右)按顺序置于加样槽中,作好实验记录,加入相应的一抗约1ml,注意保证膜的所有部分同溶液接触。
③ 室温下于摇床孵育2h或4℃过夜。
④ 弃去一抗,膜条仍置于加样槽,每个槽加2-3 mlPBST,上摇床洗涤洗涤5-10min ,换液,反复4次。
酶标记二抗与一抗的结合
① 根据实验需要和设计选择合适的酶标二抗和稀释浓度(用含0.5%脱脂奶粉的PBS稀释),每个加样槽中加入二抗1ml左右室温下于摇床孵育1h或4℃过夜,注意保证膜的所有部分同溶液接触。
②弃去二抗,膜条仍置于加样槽,每个槽加2-3 mlPBST,上摇床洗涤洗涤5-10min ,换液,反复4次。
显色反应(注:二抗一般有两种常用标记酶,HRP和AP,其相对应的显色底物试剂盒为DAB和BCIP/NBT)
① HRP标记二抗显色
用DAB KIT(KPL LOT NO YM107 CAT:54-10-00)显色,按顺序依次加Tris Buffer 3滴,DAB Substrate 3滴,Peroxide solution 2滴于5ml蒸馏水中,避光,混匀,将膜加入显色液中避光显色15 min左右终止反应,记录实验结果,将NC膜晾干扫描保存
② AKP标记二抗显色
用AKP缓冲液洗膜5min,弃去AP缓冲液,加入显色液(66µlNBT溶液同10mlAKP缓冲液充分混合均匀后加入33µl BCIP溶液1h内使用),室温下显色(37℃可加速反应),显色反应通常在30min内可完成。用20mM EDTA/TBS洗膜终止反应,记录实验结果,将NC膜晾干扫描保存。反应溶液可预先配置,可在4℃储存一年以上。Anti-TSARG7/FITC 荧光素标记精子发生相关的新基因抗体IgG Anti-TSFP1/SP1 /FITC 荧光素标记SP1转录生长因子抗体IgG Anti-tsg101/FITC 荧光素标记tsg101抗体IgG Anti-TSHR/FITC 荧光素标记促甲状腺素受体抗体IgG Anti-TSHR(CT)/FITC 荧光素标记促甲状腺素受体抗体(C端)IgG Anti-TSHR /FITC 荧光素标记促甲状腺素受体抗体IgG Anti-TSHR(NT)/FITC 荧光素标记促甲状腺素受体抗体(N端)IgG Anti-TSLC1/FITC 荧光素标记肺癌肿瘤阻抑基因1抗体IgG Anti-TSLP/FITC 荧光素标记淋巴细胞生成素-1抗体IgG Anti-TTF-1/FITC 荧光素标记甲状腺核转录因子-1/甲状腺特异增强子结合蛋白抗体IgG Anti-TTF-2/FITC 荧光素标记甲状腺转录因子-2抗体IgG Anti-Tubb3/FITC 荧光素标记β微管蛋白-Ⅲ抗体IgG Anti-Tubulin-α/FITC 荧光素标记微管蛋白α抗体IgG
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