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荧光素标记精子发生相关的新基因抗体IgG相关知识

2013年02月28日 16:33:30人气:248来源:上海安研商贸有限公司

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关 键 词荧光素标记精子发生相关的新基因抗体IgG,Anti-TSARG7/FITC,荧光素标记精子发生相关的
【资料简介】

荧光素标记精子发生相关的新基因抗体IgG相关知识

Anti-TSARG7/FITC  荧光素标记精子发生相关的新基因抗体IgG
Anti-TSFP1/SP1 /FITC  荧光素标记SP1转录生长因子抗体IgG
Anti-tsg101/FITC  荧光素标记tsg101抗体IgG
Anti-TSHR/FITC  荧光素标记促甲状腺素受体抗体IgG
Anti-TSHR(CT)/FITC  荧光素标记促甲状腺素受体抗体(C端)IgG
Anti-TSHR /FITC  荧光素标记促甲状腺素受体抗体IgG
Anti-TSHR(NT)/FITC  荧光素标记促甲状腺素受体抗体(N端)IgG
Anti-TSLC1/FITC  荧光素标记肺癌肿瘤阻抑基因1抗体IgG
Anti-TSLP/FITC  荧光素标记淋巴细胞生成素-1抗体IgG
Anti-TTF-1/FITC  荧光素标记甲状腺核转录因子-1/甲状腺特异增强子结合蛋白抗体IgG
Anti-TTF-2/FITC  荧光素标记甲状腺转录因子-2抗体IgG
Anti-Tubb3/FITC  荧光素标记β微管蛋白-Ⅲ抗体IgG
Anti-Tubulin-α/FITC  荧光素标记微管蛋白α抗体IgG
Anti-Tubulin-β/FITC  荧光素标记微管蛋白抗体IgG
Anti-Tubulin-β/FITC  荧光素标记微管蛋白抗体IgG
Anti-β-Actin/HRP  辣根过氧化物酶标记β-肌动蛋白(抗体)
Anti-Tubulin-γ/FITC  荧光素标记微管蛋白-γ抗体IgG

免疫检测
一抗与靶蛋白的结合
封闭的膜用PBST漂洗2-3次。
将加样槽洗涤干净,用蒸馏水润洗,晾干,将膜用一次性手套覆盖好,按标记和实验设计切下膜条(一般为3 mm宽左右)按顺序置于加样槽中,作好实验记录,加入相应的一抗约1ml,注意保证膜的所有部分同溶液接触。
室温下于摇床孵育2h4过夜。
弃去一抗,膜条仍置于加样槽,每个槽加2-3 mlPBST,上摇床洗涤洗涤5-10min ,换液,反复4次。
  
酶标记二抗与一抗的结合
根据实验需要和设计选择合适的酶标二抗和稀释浓度(用含0.5%脱脂奶粉的PBS稀释),每个加样槽中加入二抗1ml左右室温下于摇床孵育1h4过夜,注意保证膜的所有部分同溶液接触。
弃去二抗,膜条仍置于加样槽,每个槽加2-3 mlPBST,上摇床洗涤洗涤5-10min ,换液,反复4次。

显色反应(注:二抗一般有两种常用标记酶,HRPAP,其相对应的显色底物试剂盒为DABBCIP/NBT
HRP标记二抗显色
   
DAB KITKPL LOT NO YM107 CAT54-10-00)显色,按顺序依次加Tris Buffer 3滴,DAB Substrate 3,Peroxide solution 2滴于5ml蒸馏水中,避光,混匀,将膜加入显色液中避光显色15 min左右终止反应,记录实验结果,将NC膜晾干扫描保存
        AKP标记二抗显色
   
AKP缓冲液洗膜5min,弃去AP缓冲液,加入显色液(66µlNBT溶液同10mlAKP缓冲液充分混合均匀后加入33µl BCIP溶液1h内使用),室温下显色(37可加速反应),显色反应通常在30min内可完成。用20mM EDTA/TBS洗膜终止反应,记录实验结果,将NC膜晾干扫描保存。反应溶液可预先配置,可在4储存一年以上。

Anti-TSARG7/FITC  荧光素标记精子发生相关的新基因抗体IgG
Anti-TSFP1/SP1 /FITC  荧光素标记SP1转录生长因子抗体IgG
Anti-tsg101/FITC  荧光素标记tsg101抗体IgG
Anti-TSHR/FITC  荧光素标记促甲状腺素受体抗体IgG
Anti-TSHR(CT)/FITC  荧光素标记促甲状腺素受体抗体(C端)IgG
Anti-TSHR /FITC  荧光素标记促甲状腺素受体抗体IgG
Anti-TSHR(NT)/FITC  荧光素标记促甲状腺素受体抗体(N端)IgG
Anti-TSLC1/FITC  荧光素标记肺癌肿瘤阻抑基因1抗体IgG
Anti-TSLP/FITC  荧光素标记淋巴细胞生成素-1抗体IgG
Anti-TTF-1/FITC  荧光素标记甲状腺核转录因子-1/甲状腺特异增强子结合蛋白抗体IgG
Anti-TTF-2/FITC  荧光素标记甲状腺转录因子-2抗体IgG
Anti-Tubb3/FITC  荧光素标记β微管蛋白-Ⅲ抗体IgG
Anti-Tubulin-α/FITC  荧光素标记微管蛋白α抗体IgG

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