大鼠内皮素酶联免疫试剂盒使用说明书

【资料简介】

大鼠内皮素酶联免疫试剂盒概述  
内皮素是一种由21个氨基酸组成的活性多肽，为目前已知缩血管活性zui强的物质。在生理状态下，由于内皮细胞合成内皮素很少且清除速度快，故血浆中内皮素浓度很低。 但在内皮细胞损伤、组织缺血缺氧等情况下，内皮细胞大量合成内皮素并释放入血，成为参与疾病病理生理过程的重要体液因素。 实验原理  本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中内皮素水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入内皮素、生物素化的抗大鼠内皮素抗体、HRP标记的亲和素，经过*洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的。颜色的深浅和样品中的内皮素呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。 
预期应用  ELISA法定量测定大鼠血浆或其它相关液体中内皮素1（ET-1）含量。 
大鼠内皮素酶联免疫试剂盒试剂盒组成  
1. 酶联板：一块（96孔）  
2. 标准品（冻干品）：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，其浓度为10000 pg/mL，做 系列倍比稀释后，分别稀释成10000 pg/mL，5000 pg/mL ，2500 pg/mL，1250 pg/mL，625 pg/mL，312 pg/mL，156 pg/mL，其原液直接作为zui高标准浓度，样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/mL，临用前15分钟内配制。  如配制5000 pg/ml标准品：取0.5ml 10000 pg/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3. 样品稀释液：1×20ml/瓶。
4. 检测稀释液A：1×10ml/瓶。 5. 检测稀释液B：1×10ml/瓶。  
6. 检测溶液A：1×120ul/瓶（1：100）临用前以检测稀释液A1：100稀释。
7. 检测溶液B：1×120ul/瓶（1：100）临用前以检测稀释液B1：100稀释。
8. 底物溶液：1×10ml/瓶。  
9. 浓洗涤液：1×30ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。  
10. 终止液：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。  
11.   标本的采集及保存  
1．血清：标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。  
2．血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟，或将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。    
注：标本溶血会影响zui后大鼠内皮素酶联免疫试剂盒检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。