人醛固酮ELISA检测试剂盒说明书

【资料简介】

试验原理：
ELISA检测试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知ALD浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将ALD和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中ALD的浓度呈比例关系。

自备材料
1． 蒸馏水。
2． 加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3． 振荡器及磁力搅拌器等。
 
安全性
1． 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
2． 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3． 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
 
操作注意事项
1． 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
2． 实验中不用的板条应立即放回包装袋中，ELISA检测试剂盒密封保存，以免变质。
3． 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4． 使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
5． 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6． 洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7． 底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8． 加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9． 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
 
样品收集、处理及保存方法
1、 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2、 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、 组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液
5、 保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
 
试剂的准备
1． 标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行：

2． 洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。
 
 
操作步骤
1． 使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。
2． 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。
3． 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。
4． 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
5． 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
6． 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
7． 每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。
8． 取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。
9． 在450nm波长处测定各孔的OD值。

局限
6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到的结果。
 
试剂盒性能
1. 灵敏度：zui小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性：不与其它细胞因子反应。
3. 重复性：板内、板间变异系数均小于10%。
 
结果 判 断 与分析
1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值
 
2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），ELISA检测试剂盒相应的ALD标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的ALD含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。
 
3、检测值范围：0-800pg/ml
 
4、敏感度： 1.0 pg/ml

Y142227 橄榄苦苷 Oleuropein 橄榄苦甙 20mg/支 32619-42-4
Y142228 党参炔苷 Lobetyolin 党参炔甙 10mg/支 136085-37-5
Y142229 咪达唑仑杂质 有关物质 20mg 171270-201001
Y142230 N-脱烷基西泮 有关物质 20mg 171270-201001
Y142231 氯氮卓杂质Ⅰ 有关物质 50mg/支 171268-201001
Y142232 2-氨基-5-氯二苯酮 有关物质 50mg/支 171268-201001
Y142233 硝西泮杂质 有关物质 50mg/支 171267-201001
Y142234 2-氨基-5-硝基二苯酮 有关物质 50mg/支 171267-201001
Y142235 盐酸吗啡 鉴别 自取 100mg 171256-200401
Y142236 劳拉西泮杂质B 检查 100mg 171254-200401
Y142237 2-氨基-2’,5-二氯二苯甲酮 检查 100mg 171254-200401
Y142238 盐酸纳曲酮 含量测定 20mg 171249-200802
Y142239 盐酸洛非西定 含量测定 20mg 171246-200301
Y142240 盐酸丁丙诺啡 含量测定 自取 20mg 171244-200704
Y142241 苯甲酰爱康宁 含量测定 20mg 171233-200606
Y142242 盐酸甲基爱康宁 20mg
Y142243 2-氨基-2’-氯-5-硝基二苯酮 检查 100mg 171228-200602
Y142244 氯硝西泮 含量测定 自取 100mg 171227-200302
Y142245 那可丁 含量测定 100mg 171224-200403
Y142246 乙酰可待因 含量测定 20mg 171209-200507
Y142247 O3-单乙酰吗啡氨基磺酸盐 含量测定 20mg 171208-200609
Y142248 06-单乙酰吗啡盐酸盐 20mg
Y142249 细菌内毒素（精品） 可用于建立动物发热模型 -20℃，避光 1mg/支 150602-200502
Y142250 细菌内毒素（工作品） 检查 -20℃，避光 10支/盒 150601-201072
Y142251 细菌内毒素 检查 -20℃，避光 10000EU/支 150600-200707
Y142252 抗甲状腺过氧化物酶抗体 免疫测定用 -20℃，避光 430IU/支 150557-200601
Y142253 抗甲状腺球蛋白抗体 免疫测定用 -20℃，避光 4000IU/支 150556-200601
Y142254 人绒毛膜促性腺激素 免疫测定用 -20℃，避光 22.8IU/支 150555-9003
Y142255 胰高血糖素 免疫测定用 -20℃，避光 19ng/支 150554-9604
Y142256 人胰岛素C-肽 免疫测定用 -20℃，避光 21ng/支 150553-9911
Y142257 反三碘甲腺原氨酸 免疫测定用 -20℃，避光 23ng/支 150552-0004
Y142258 甲状腺素 免疫测定用 -20℃，避光 1000ng/支 150551-0004
Y142259 三碘甲腺原氨酸 免疫测定用 -20℃，避光 50ng/支 150550-0004
Y142260 游离前列腺特异抗原 免疫测定用 -20℃，避光 0.5ml/支 150544-200702
Y142261 前列腺特异抗原 免疫测定用 -20℃，避光 150ng/支 150543-0004
Y142262 甲胎蛋白 免疫测定用 -20℃，避光 800ng/661IU/支 150542-0004
Y142263 癌胚抗原 免疫测定用 -20℃，避光 320ng/支 150541-0210
Y142264 铁蛋白 免疫测定用 -20℃，避光 2ug/支 540-9410
Y142265 人胎盘泌乳素（HPL） 免疫测定用 -20℃，避光 14.2μg/支 150536-9903
Y142266 人绒毛膜促性腺激素β亚单位 免疫测定用 -20℃，避光 240ng/0.5ml/支 150535-201002
Y142267 生长激素 免疫测定用 -20℃，避光 1.22mIU/0.61ug/支 534-9604
Y142268 促卵泡生成素 免疫测定用 -20℃，避光 450mIU/支 150533-0212
Y142269 泌乳素 免疫测定用 -20℃，避光 9mIU/支 150532-0004
Y142270 促黄体生成激素（LH） 免疫测定用 -20℃，避光 930mIU 150531-201003
Y142271 促甲状腺素（TSH） 免疫测定用 -20℃，避光 600μIU 150530-0312
Y142272 缩宫素（合成） 效价测定 -20℃，避光 21IU/支 050529-200902
Y142273 人绝经尿促性素（HMG） 效价测定 -20℃，避光 FSH190IU、LH242IU/支 150524-200503
Y142274 猪胰岛素原 试剂盒测试 -20℃，避光 2.2μg/支 523-8901
Y142275 毒毛旋花子苷G 效价测定 2-8℃，避光 20mg/支 150514-870405
Y142276 绒促性素 效价测定 -20℃，避光 60IU/支 150513-200409
Y142277 磷酸组胺 检查用 2-8℃，避光 25mg/支 150510-200412
Y142278 葡萄糖酸锑钠 效价测定 2-8℃，避光 约2.5g 150506-8906
Y142279 猪胰岛素（高纯〕 效价测定 -20℃，避光 20mg/支 150505-9609
Y142280 胰岛素（猪） 效价测定 -20℃，避光 20mg/支 504-8708
Y142281 垂体后叶 效价测定 2-8℃，避光 约30mg 502-8709
Y142282 洋地黄 效价测定 2-8℃，避光 约2.5g 501-8004
Y142283 游离三碘甲状腺原氨酸 552/362fmol 150002-
Y142284 游离甲状腺素 553/380fmol 150001-
Y142285 脱苏氨醇8奥曲肽 供醋酸奥曲肽 密封，4℃保存 2mg 140795-201001
Y142286 N-乙酰-半胱氨酸1-鲑降钙素 供鲑降钙素 密封，4℃保存 2mg 140793-201001
Y142287 前列腺素B1 供前列地尔 -20℃，避光 见标示量 140791-200801
Y142288 前列腺素A1 供前列地尔 -20℃，避光 见标示量 140790-200801
Y142289 肝素钠 供鉴别与有关物质系统适用性 常温，避光 100mg 140787-201001
Y142290 乌司他丁 供2010版 -20℃，避光 1000u 140785-201001
Y142291 β-丙氨酸 检查用 常温，避光 20mg 140783-200801
Y142292 盐酸阿糖胞苷 供盐酸阿糖胞苷 常温，避光 50mg 140784-201001
Y142293 醋酸精氨酸 供氨基酸鉴别 常温，避光 50mg 140781-200801
Y142294 聚普瑞锌 供聚普瑞锌 2-8℃，密封 20mg 140772-201001