48Ｔ基质金属蛋白酶9人ELISA试剂盒说明书

【资料简介】

基质金属蛋白酶9 （MMP-9）人ELISA试剂盒说明书
本试剂仅供研究使用 标本：血清或血浆

试验原理：
MMP-9试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知MMP-9浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将MMP-9和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤人ELISA试剂盒去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中MMP-9的浓度呈比例关系。
人ELISA试剂盒自备材料
蒸馏水。
加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
振荡器及磁力搅拌器等。
安全性
避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
操作注意事项
试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
样品收集、处理及保存方法
血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液
保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

操作步骤
使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。
根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。
加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。
甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。
取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。
在450nm波长处测定各孔的OD值。
局限
6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到的结果。
试剂盒性能
1. 灵敏度：zui小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性：不与其它细胞因子反应。
3. 重复性：板内、板间变异系数均小于10%。
结 果 判 断 与 分 析
1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值
2、以吸光度OD值为纵坐标（Y）人ELISA试剂盒相应的MMP-9标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的MMP-9含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。
3、检测值范围：0-800ng/ml
4、敏感度： 1.0 ng/ml

Y139695 辛基三嗪酮相关物质C标准品 20mg 乙基己基三嗪酮相关物质C
Y139696 氟替卡松丙酸酯相关物质混合物标准品 25mg NA 
Y139697 氟替卡松丙酸酯鼻喷剂分离度用混合物标准品 25mg NA 
Y139698 醋酸戈那瑞林杂质标准品 10mg NA 
Y139699 重组蛋白A标准品 ea NA 
Y139700 卡巴拉汀酒石酸盐K-异构体 20mg NA 
Y139701 群勃龙醋酸酯系统适用性混合物 30mg NA 
Y139702 依诺肝素钠溶液用于生物测定标准品 1ml NA
Y139703 胺碘酮相关物质E标准品 Amiodarone Related Compound E 25mg Amiodarone R...
Y139704 尼泊金甲酯标准品 Methylparaben  125mg 99-76-3 
Y139705 丙戊酸相关物质A标准品 0．25ml 99-67-2 
Y139706 水杨酸相关物质A标准品 100mg 9-96-7 
Y139707 丙戊酸标准品 Valproic Acid  500mg 99-66-1 
Y139708 昂丹司琼杂质D标准品 30mg 99614-64-9 
Y139709 昂丹司琼标准品 Ondansetron  300mg 99614-02-5 
Y139710 瑞格列奈相关物质B标准品 50mg 99469-99-5 
Y139711 盐酸文拉法辛标准品 Venlaine Hydrochloride  100mg 99300-78-4 
Y139712 酒石酸唑吡坦标准品 Zolpidem Tartrate CIV 200mg 99294-93-6 
Y139713 碱式没食子酸铋标准品 Bismuth Subgallate （AS） 2g 99-26-3
Y139714 克拉霉素混合物R标准品 10mg 992-62-1
Y139715 红霉素相关物质N标准品 50mg 992-62-1
Y139716 吡嗪酰胺标准品 Pyrazinamide  200mg 98-96-4 
Y139717 （-）-表没食子儿茶素没食子酸酯标准品 20mg 989-51-5
Y139718 烟酰胺标准品 Niacinamide （Vitamin B3） 500mg 98-92-0 
Y139719 异丙苯标准品 Cumene 1.2ml×3ampules 98-82-8
Y139720 甲酚曲唑三硅氧烷相关物质B标准品 25mg 98809-58-6
Y139721 醋酸倍他米松标准品 Betamethasone Acetate 500mg 987-24-6
Y139722 阿散酸标准品 Arsanilic Acid 25mg 98-50-0
Y139723 琥珀酸美托洛尔标准品 Metoprolol Succinate  200mg 98418-47-4 
Y139724 非那雄胺标准品 Finasteride  200mg 98319-26-7 
Y139725 马来酸溴苯那敏标准品 Brompheniramine Maleate 125mg 980-71-2
Y139726 S-腺苷-L-高半胱氨酸标准品 S-Adenosyl-L-Homocysteine 50mg 979-92-0
Y139727 泮托拉唑相关物质C标准品 人ELISA试剂盒 20mg 97963-62-7 
Y139728 戊酸雌二醇标准品 Estradiol Valerate 100mg 979-32-8
Y139729 二硫化四乙基秋兰姆标准品 Disulfiram 200mg 97-77-8
Y139730 螺内酯相关物质A标准品 100mg 976-71-6 
Y139731 尿囊素标准品 Allantoin 200mg 97-59-6
Y139732 苄星头孢匹林标准品 Cephapirin Benzathine 100mg 97468-37-6
Y139733 苍白松果菊标准品 1g 97281-15-7
Y139734 托吡酯标准品 Topiramate  150mg 97240-79-4 
Y139735人ELISA试剂盒 睾内酯酮标准品 Testolactone CIII 125mg 968-93-4