免费代测人CD14 ELISA检测试剂盒

【资料简介】

本试剂仅供研究使用  标本：血清或血浆

 

试验原理：

CD14试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.ELISA检测试剂盒已知CD14浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将CD14和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中CD14的浓度呈比例关系。

自备材料

1． 蒸馏水。

2． 加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。

3． 振荡器及磁力搅拌器等。

 

安全性

1． 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。

2． 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

3． 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

 

操作注意事项

1． 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

2． 实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

3． 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

4． 使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

5． 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

6． 洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

7． 底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

8． 加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

9． 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

 

ELISA检测试剂盒样品收集、处理及保存方法

1、 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2、 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。

3、 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4、 保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

 

试剂的准备

标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。

1． 洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。

 

操作步骤

1． 使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。

2． 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。

3． 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

4． 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

5． 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。

6． 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

7． 每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。

8． 取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。

9． 在450nm波长处测定各孔的OD值。

 

局限

6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到的结果。

 

试剂盒性能

1. 灵敏度：zui小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。

2. 特异性：不与人其它细胞因子反应。

3. 重复性：板内、板间变异系数均小于10%。

 

结 果 判 断 与 分 析

1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值

 

2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），ELISA检测试剂盒相应的CD14标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的CD14含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。

 

3、检测值范围：0-80ng/ml

 

4、敏感度： 0.1 ng/ml

Mouse single stranded DNA Antibody,ssDNA ELISA Kit  小鼠抗单链DNA抗体/变性DNA抗体 X17991  96T
BRAK/CXCL14（Human Breast and kidney expressed chemokine,BRAK） ELISA Kit  人胸肾表达趋化因子 X17992  96T
（BAX）Rat Bcl-2 associated X protein,Bax ELISA Kit  大鼠Bcl-2相关X蛋白 X17993  96T
TNF- Alpha （Rabbit Tumor necrosis factor Alpha） ELISA Kit  兔子肿瘤坏死因子α X17994  96T
Mouse phosphatidylserine,PS ELISA Kit  小鼠磷脂酰丝氨酸 X17995  96T
TGF- Beta （Rabbit Transforming Growth factor Beta） ELISA Kit  兔子转化生长因子β X17996  96T
ACTH ELISA Kit  鱼促肾上腺皮质激素 X17997  96T
sFAS/Apo-1（Rat soluble Factor-related Apoptosis,sFAS/Apo-1 ）ELISA Kit  大鼠可溶性凋亡相关因子 X17998  96T
BLC-1/CXCL13（Human B-Lymphocyte Chemoattractant 1,BLC-1） ELISA Kit  人B-淋巴细胞趋化因子 X17999  96T
CTAP III （Human connective tissue-activating peptide III ,CTAP III ） ELISA Kit  人结缔组织活化肽Ⅲ X18000  96T
Annexin A2 human c ELISA Kit   人膜粘连蛋白 Ⅱ ELISA 试剂盒 X18001  96T
Mouse choline phosphoglyceride,PC/CPG ELISA Kit  小鼠胆碱磷酸酯 X18002  96T
ChAT （Rat Choline Acetyltransferase ） ELISA Kit  大鼠胆碱乙酰转移酶 X18003  96T
bFGF （Rabbit basic fibroblast growth factor） ELISA Kit  兔子碱性成纤维细胞生长因子 X18004  96T
PGE2 （Rabbit Prostaglandin E2） ELISA Kit  兔子前列腺素E2 X18005  96T
FSH ELISA Kit  鱼促卵泡素 X18006  96T
IL-7（Rat Interleukin-7） ELISA kit  大鼠白介素7 X18007  96T
Mouse Beta-Defensins, Beta-DF ELISA Kit  小鼠β-防御素 X18008  96T
M-CSFR（Human Macrophage Colony-Stimulating Factor Receptor,M-CSFR） ELISA Kit  人巨噬细胞集落刺激因子受体 X18009  96T
TUNEL  细胞凋亡原位检测试剂盒（我公司提供代测服务） X18010  10人份
TUNEL   细胞凋亡原位检测试剂盒（我公司提供代测服务） X18011  50人份
STK（Reat serine/threonine protein kinase,STK） ELISA Kit  大鼠丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶 X18012  96T