免费代测人神经营养因子3ELISA检测试剂盒

【资料简介】

本试剂仅供研究使用  标本：血清或血浆

 

试验原理：

NT-3试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.ELISA检测试剂盒已知NT-3浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将NT-3和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中NT-3的浓度呈比例关系。

自备材料

1． 蒸馏水。

2． 加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。

3． 振荡器及磁力搅拌器等。

 

安全性

1． 避免直接接触终止液和底物A、B。ELISA检测试剂盒一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。

2． 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

3． 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

 

操作注意事项

1． 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

2． 实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

3． 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

4． 使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

5． 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

6． 洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

7． 底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

8． 加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

9． 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

 

样品收集、处理及保存方法

1、 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2、 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。

3、 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4、 保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

 

试剂的准备

标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。

1． 洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。

 

操作步骤

1． 使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。

2． 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。

3． 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

4． 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

5． 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。

6． 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

7． 每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。

8． 取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。

9． 在450nm波长处测定各孔的OD值。

局限

6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到的结果。

 

试剂盒性能

1. 灵敏度：zui小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。

2. 特异性：不与其它细胞因子反应。

3. 重复性：板内、板间变异系数均小于10%。

 

结 果 判 断 与 分 析

1、ELISA检测试剂盒仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值

 

2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的NT-3标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的NT-3含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。

 

3、检测值范围：0-800pg/ml

 

4、敏感度： 1.0 pg/ml

醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glyceraldehyde-3-Phosphate Dehydrogenase (GAPDH) 48T/96T Y11077 Homo sapiens (Human)
成纤维细胞生长因子23(FGF23)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 23 (FGF23) 48T/96T Y11078 Rattus norvegicus (Rat)
谷丙转氨酶(ALT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Alanine Aminotransferase (ALT) 48T/96T Y11079 Rattus norvegicus (Rat)
激肽释放酶10(KLK10)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Kallikrein 10 (KLK10) 48T/96T Y11080 Rattus norvegicus (Rat)
组织蛋白酶S(CTSS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cathepsin S (CTSS) 48T/96T Y11081 Homo sapiens (Human)
白介素32(IL32)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 32 (IL32) 48T/96T Y11082 Homo sapiens (Human)
亮氨酸丰富α2-糖蛋白1(LRG1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Leucine Rich Alpha-2-Glycoprotein 1 (LRG1) 48T/96T Y11083 Homo sapiens (Human)
肌腱蛋白X(TNX)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tenascin X (TNX) 48T/96T Y11084 Homo sapiens (Human)
肌腱蛋白X(TNX)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tenascin X (TNX) 48T/96T Y11085 Rattus norvegicus (Rat)
肌腱蛋白X(TNX)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tenascin X (TNX) 48T/96T Y11086 Mus musculus (Mouse)
谷胱甘肽过氧化酶1(GPX1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glutathione Peroxidase 1 (GPX1) 48T/96T Y11087 Mus musculus (Mouse)
黑色素瘤抗原家族A1(MAGEA1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Melanoma Antigen Family A1 (MAGEA1) 48T/96T Y11088 Mus musculus (Mouse)
芳香胺-N-乙酰基转移酶(AANAT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Arylalkylamine-N-Acetyltransferase (AANAT) 48T/96T Y11089 Homo sapiens (Human)
肝肾骨碱性磷酸酶(ALPL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Alkaline Phosphatase, Liver/Bone/Kidney (ALPL) 48T/96T Y11090 Mus musculus (Mouse)
多配体蛋白聚糖4(SDC4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Syndecan 4 (SDC4) 48T/96T Y11091 Homo sapiens (Human)
组织因子通道抑制因子2(TFPI2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tissue Factor Pathway Inhibitor 2 (TFPI2) 48T/96T Y11092 Homo sapiens (Human)
免疫球蛋白D(IgD)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Immunoglobulin D (IgD) 48T/96T Y11093 Homo sapiens (Human)
肌酸激酶MB同工酶(CKMB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Creatine Kinase MB Isoenzyme (CKMB) 48T/96T Y11094 Mus musculus (Mouse)
肌酸激酶MB同工酶(CKMB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Creatine Kinase MB Isoenzyme (CKMB) 48T/96T Y11095 Rattus norvegicus (Rat)
α1-抗胰蛋白酶(α1AT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Alpha-1-Antitrypsin (a1AT) 48T/96T Y11096 Mus musculus (Mouse)
血小板衍生生长因子B(PDGFB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Plaet Derived Growth Factor Subunit B (PDGFB) 48T/96T Y11097 Sus scrofa; Porcine (Pig)
血管内皮生长因子A(VEGFA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Vascular Endothelial Growth Factor A (VEGFA) 48T/96T Y11098 Sus scrofa; Porcine (Pig)
叉头框蛋白M1(FOXM1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Forkhead Box Protein M1 (FOXM1) 48T/96T Y11099 Mus musculus (Mouse)
神经调节素1(NRG1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neuregulin 1 (NRG1) 48T/96T Y11100 Rattus norvegicus (Rat)
神经调节素1(NRG1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neuregulin 1 (NRG1) 48T/96T Y11101 Mus musculus (Mouse)
膜联蛋白A2(ANXA2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Annexin A2 (ANXA2) 48T/96T Y11102 Homo sapiens (Human)
表皮调节素(EREG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Epiregulin (EREG) 48T/96T Y11103 Homo sapiens (Human)
神经纤维素2(NF2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neurofibromin 2 (NF2) 48T/96T Y11104 Mus musculus (Mouse)
心型脂肪酸结合蛋白(FABP3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Fatty Acid Binding Protein 3, ELISA检测试剂盒Muscle And Heart (FABP3) 48T/96T Y11105 Rattus norvegicus (Rat)
顶体蛋白(ACR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Acrosin (ACR) 48T/96T Y11106 Homo sapiens (Human)