人白三烯D4Elisa试剂盒生产商,人（LTD4）说明书

【资料简介】

人白三烯D4Elisa试剂盒生产商,人(LTD4)说明书

本试剂仅供研究使用      

目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中白三烯D4(LTD4)的含量。
实验原理：
   本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白三烯D4(LTD4)水平。用纯化的人白三烯D4(LTD4)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白三烯D4(LTD4)，再与HRP标记的白三烯D4(LTD4)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的白三烯D4(LTD4)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人白三烯D4(LTD4)浓度。

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2.    加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品zui终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.    温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.    配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。
5.    洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.    加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.    温育：操作同3。
8.    洗涤：操作同5。
9.    显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟. 
10.    终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.    测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

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