ELISA试剂盒的使用会造成膜蛋白结构

【资料简介】

     目前在PDB里的绝大部分ELISA试剂盒膜蛋白结构是在去垢剂的环境下测定的。它的各种聚集体包括寡聚体、原纤维和纤维与老年痴呆症的病理密切相关，研究这些聚集体的三维结构可以为揭示老年痴呆症发生发展的机制提供分子结构基础。杨俊课题组解析得到了在磷脂双层膜环境下的原子水平的Aβ纤维单体的三维结构，ELISA试剂盒揭示了磷脂膜环境特别是磷脂极性头的电荷性质对Aβ纤维结构的影响，提供了Aβ聚集的分子机制。因此在更接近DAGK的天然膜的环境下进行结构分析有着更重要的意义。杨俊课题组利用高分辨的固体NMR多维谱得到了DAGK在接近天然膜环境的E.Coli膜上的二级结构和拓扑结构，通过对比三种去垢剂/磷脂膜环境中DAGK的二级结构，他们发现在膜蛋白的结构分析中去垢剂的失真。
    ELISA试剂盒磷脂膜还能影响淀粉样蛋白的聚集机制。Aβ是一类具有39-42个氨基酸的多肽，所以但是在去垢剂的环境下的膜蛋白的结构是不是在磷脂双分子环境下的真实结构是一个备受关注的问题。固体NMR因能够在磷脂双分子层的环境下解析膜蛋白的三维结构而成为证实膜蛋白结构真实性的重要工具。大肠杆菌甘油二脂激酶（DAGK）是一个重要的三跨膜蛋白，它的三维结构已经被液体核磁共振和X-射线晶体学的方法所解析。

    但是由于这两种方法所用的去垢剂/磷脂膜不同，得到的结构差别很大。这两种方法都不是在DAGK的天然膜环境中进行，因此在更接近DAGK的天然膜的环境下进行结构分析有着更重要的意义。 ELISA试剂盒膜蛋白所处的磷脂膜/去垢剂环境对膜蛋白的结构和功能有重要的影响。膜蛋白结构测定手段如X-射线晶体学和液体NMR很难在磷脂双分子膜的环境下研究膜蛋白的结构，