人黑色素瘤转移表面黏附分子（MMSAM）ELISA试剂盒

【资料简介】

人黑色素瘤转移表面黏附分子(MMSAM)ELISA试剂盒

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1.一抗及标记一抗抗体  2.二抗及标记二抗抗体  3.蛋白及抗原  4.人Elisa试剂盒  5.小鼠Elisa试剂盒 6.大鼠Elisa试剂盒  7.豚鼠Elisa试剂盒  8.猪Elisa试剂盒  9.鸡Elisa试剂盒  10.各种动物Elisa试剂盒  11.植物Elisa试剂盒  12.微生物Elisa试剂盒  13.分离试剂  14.酶与辅酶  15.蛋白质  16.抗生素  17.放免试剂盒  18.各种动物细胞株、细胞系.....  等等

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【实验原理】：试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中指标的水平，用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入相应的抗原，再与HRP标记的抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的指标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中指标的浓度/含量等。

【标本要求】：

1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融

2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

人黑色素瘤转移表面黏附分子(MMSAM)ELISA试剂盒

Materials provided with the kit

Materials provided with

the kit

48determinations 96 determinations Storage

User manual 1 1

Closure plate membrane 2 2

Sealed bags 1 1

Microelisa stripplate 1 1 2-8℃

Standard：10.8U/L 0.5ml×1 bottle 0.5ml×1 bottle 2-8℃

Standard diluent 1.5ml×1 bottle 1.5ml×1 bottle 2-8℃

HRP-Conjugate reagent 3ml×1 bottle 6ml×1 bottle 2-8℃

Sample diluent 3ml×1 bottle 6ml×1 bottle 2-8℃

Chromogen Solution A 3ml×1 bottle 6ml×1 bottle 2-8℃

Chromogen Solution B 3ml×1 bottle 6ml×1 bottle 2-8℃

Stop Solution 3ml×1 bottle 6ml×1 bottle 2-8℃

wash solution

（20ml×20 fold）

×1bottle

（20ml×30 fold）

×1bottle

2-8℃

Specimen requirements

1. serum- coagulation at room temperature 10-20 mins，centrifugation 20-min at the speed of

2000-3000 r.p.m. remove supernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again.

2. plasma-use suited EDTA, citrate or heparinized plasma as an anticoagulant,mix 10-20

mins ,centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant, If

precipitation appeared, Centrifugal again.

3. Urine-collect sue a sterile container, centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m.

remove supernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again. The Operation of

Hydrothorax and cerebrospinal fluid Reference to it.

4. cell culture supernatant-detect secretory components, collect sue a sterile container,

centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant,detect the

composition of cells, Dilut cell suspension with PBS（PH7.2-7.4）, Cell concentration

reached 1 million / ml, repeated freeze-thaw cycles, damage cells and release of

intracellular components, centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove

supernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again.

5. Tissue samples- After cutting samples, check the weight,add PBS（PH7.2-7.4）, Rapidly

frozen with liquid nitrogen, maintain samples at 2-8℃ after melting,add PBS（PH7.4）,Homogenized by hand or Grinders, centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m.

remove supernatant.

6. extract as soon as possible after Specimen collection,and according to the relevant

literature, and should be experiment as soon as possible after the extraction. If it can’t,

specimen can be kept in -20 ℃ to preserve, Avoid repeated freeze-thaw cycles.

7. Can’t detect the sample which contain NaN3, because NaN3 inhibits HRP active.

人黑色素瘤转移表面黏附分子(MMSAM)ELISA试剂盒

【样本的处理】：

1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.

7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

【注意事项】：

1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，*使用排枪加样。

1. 请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔*孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请zui后乘以总稀释倍数（×n×5）。
2. 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物请避光保存。

7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9．本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

【保存】：2-8℃

【保质期】：6个月