劲马实验步骤之缓冲液的配制

【资料简介】

                                            劲马实验步骤之缓冲液的配制 

上海劲马实验设备有限公司按化定义缓冲溶液是由弱酸及其盐、弱碱及其盐组成的混合溶液，能在一定程度上抵消、减轻外加强酸或强碱对溶液酸度的影响，从而保持溶液的pH值相对稳定。这种溶液称为缓冲溶液。在生化研究工作中，常常需要使用缓冲溶液来维持实验体系的酸碱度。研究工作的溶液体系pH值的变化往往直接影响到研究工作的成效。如果“提取酶”实验体系的pH值变动或大幅度变动，酶活性就会下降甚至*丧失。所以配制缓冲溶液是一个*的关键步骤。一起跟随小编来看看以下步骤吧！让您更多的了解缓冲溶液的配置情况。

（一）缓冲液的组成缓冲液的组成        
缓冲液是临床生化诊断试剂的重要组成部分。由于它对外来的H+和OH-有双向调节作用，因而能为酶试剂中的待测物质反应提供zui适pH，以利于这些酶zui大限度地发挥其催化效能；也为以酸碱指示染料作为显色剂的试剂提供稳定的pH环境，以保证这些试剂和方法有准确可靠的测定结果。

一般的缓冲剂都由一共轭酸及一共轭碱组成。“酸性”缓冲液含有一弱酸及其盐（共轭碱）；“碱性”缓冲液含有弱碱及其盐（共轭酸）。共轭酸和共轭碱一起可阻止溶液pH发生剧烈的变化。当向溶液中加入H+时，共轭碱可与之部  分地结合而共轭酸，H+不再成游离状态存在；当加入OH-时，则共轭酸与之结合水及共轭碱，使OH-不再以游离状态存在而影响溶液的酸碱度。

（二）缓冲液的缓冲容量缓冲液的缓冲容量        
缓冲液维持pH恒定的效力取决于其缓冲容量的大小。缓冲容量是指使1L溶液的pH改变个1pH单位所需要的酸或碱量（mol）。缓冲容量决定于盐与酸（或碱）的真实浓度及两者的比值。缓冲液的浓度越高，缓冲容量越大。一般的缓冲液总浓度在0.05～0.2mol/L之间。当总浓度固定时，盐与酸（或碱）的比值为1时，其缓冲容量zui大；如果两者比值相差10倍以上时，则缓冲容量将大为减小。在实际工作中，不能无限制地加大缓冲液的浓度来增加其缓冲容量，因为盐类浓度过高将抑制酶的活性，对电泳分离也有不利的影响。
被稀释或加入中性盐时，其pH能基本维持恒定。在一般情况下，将缓冲液稀释1倍，其pH值只改变一个pH单位的百分之几；加入0.1mol/L中性盐溶液，只使pH值大约改变0.1。但是温度的改变不可忽视，如0.025mol/L混合磷酸盐缓冲液（用GR磷酸二氢钾3.4g，GR磷酸氢二钠3.55g，溶解于双蒸馏水至1000ml），在5℃时pH为6.95，15℃时为6.90，25℃时为6.86，35℃时为6.84。故对pH要求精密时必须注意做温度补偿，以消除由于不同温度所产生的测定误差。 

（三）配制缓冲液的注意事项配制缓冲液的注意事项  
1．所有试剂选用分析纯或优级纯，并必须恒重后方能配制。具体的恒重方法因试剂种类而有不同，如：①琥珀酸、甘氨酸、巴比妥及其钠盐放在氯化钙干燥器中至恒重；②用柠檬酸钠（含2H2O）及柠檬酸（含H2O）不需恒重直接配制其溶液；③无水醋酸钠，在100℃下干燥3h。④醋酸溶液用分析冰醋酸直接配制，然后再用氢氧化钠标准液进行标定。 
2．所用仪器必须清洁，容量仪器经过校正，以保证准确。 
3．配好的缓冲液必须用酸度计校正其pH值（准确至小数点后两位）。如对其浓度有怀疑时，则应用滴定法检查其浓度。

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以下是缓冲试剂部分试剂展示：

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三羟甲基氨基甲烷/缓血酸铵/三（羟甲基）氨基甲烷/2-氨基-2-(羟甲基)-1,3-丙二醇/氨丁三醇/*醇氨基甲烷/氨基丁三醇/三羟基甲基氨基甲烷/TRIS/Tris-base/THAM

双[三（羟甲基）氨基甲烷]/二(2-羟乙基)亚氨基三(羟甲基)甲烷/双(2-羟乙基)氨基(三羟甲基)甲烷/2,2-双二羟甲基苯胺/双(2-羟乙基)-三羟甲基氨基甲烷/N,N'-二羟基乙基-亚氨基-三羟基甲基氨基甲烷/双(2-羟乙基)胺三(羟甲基)甲烷/BIS-TRIS

双[三（羟甲基）氨基丙烷]/1,3-二[三(羟甲基)甲氨基]丙烷/BIS-TRIS 丙烷/1,3-双[ (三羟甲基)甲基氨基]丙烷/双三羟基甲氨基丙烷/BIS-TRIS propane

三羟甲基氨基甲烷盐酸盐/三(羟甲基)氨基甲烷盐酸盐/2-氨基-2-羟甲基-1,3-丙二醇盐酸盐/TRIS-HC1

三羟甲基氨基甲烷乙酸盐/三羟甲基氨基甲烷醋酸盐/TRIS醋酸盐/三(羟甲基)氨基甲烷醋酸盐/醋酸*醇氨基甲烷/TRIS acetate salt

三羟甲基氨基甲烷碳酸盐/Tris carbonate

3-(环己氨基)-1-丙磺酸/3-(环己胺)-1-丙磺酸/3-(环己氨基)-1-丙烷磺酸/3-环己基氨基丙烷磺酸/CAPS

3-(环己氨基)-1-丙磺酸钠盐/3-(环己胺)-1-丙磺酸/3-(环己氨基)-1-丙烷磺酸钠盐/3-环己基氨基丙烷磺酸钠盐/CAPS sodium salt

3-(环己氨基)2-羟基-1-丙磺酸/3-(环己胺)2-羟基-1-丙磺酸/3-环己胺基-2-羟基丙磺酸/CAPSO

3-(环己氨基)2-羟基-1-丙磺酸钠盐/3-(环己胺)2-羟基-1-丙磺酸钠盐/CAPSO 单钠盐/3-(环己氨基)-2-丙磺酸钠/CAPSO sodium salt