细胞色素P450亚酶CYP2D6（AMMC）活性荧光说明书

【资料简介】

主要用途

 细胞色素P450亚酶CYP2D6（AMMC）活性荧光定量检测试剂是一种旨在通过AMMC去甲基化酶反应系统中AMMC转化为AMHC后荧光峰值的变化，即采用荧光法来测定样品中酶活性的而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种细胞或组织裂解萃取液样品（动物、人体）或纯化微粒体样品细胞色素P450亚酶2D6的活性检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。

技术背景

细胞色素P450酶是肝细胞微粒体复合功能单加氧化酶系统的总称。其分成五十多个亚酶：CYP1至CYP51。作用在于体内外源化合物（xenobiotics），包括药物、致癌剂、化学污染物的氧化代谢，即单加氧化作用（monooxygenation）和羟化作用（hydroxylation）。AMMC羟基化酶（AMMC 7-hydroxylase）的活性是细胞色素P450亚酶2D6的诊断标记，其基于AMMC羟基化酶选择性催化细胞色素P450亚酶2D6的活性。人体细胞色素P450亚酶2D6（CYP2D6；EC1.14.14.1），主要表达在肝、肾、胎盘、脑、乳腺、肺、和肠道组织中，是肝组织细胞色素P450酶总量的4%。CYP2D6是多态性酶，在80多个等位基因上，出现变异，具有个体和种族差异，与肺癌、肝癌、黑色素瘤、巴金森氏症等疾病发生，以及药物代谢敏感性差异存在相关性。CYP2D6主要代谢三分之一的临床药物，尤其含有碱性氮原子（basic nitrogen atom）的药物，包括异喹胍（debrisoquine）的4-羟基化、鹰爪豆碱（sparteine）的氧化、抗抑郁症药物、神经松弛药（neuroleptic），以及内源性5-羟色胺（hydroxytryptamine）、神经类固醇（neurosteroid）等。同时会产生肝毒性的乙酰苯醌亚胺（N-acetyl-p-benzyquinone imine）。 基于选择性底物AMMC（3（2（N,N-diethyl-N-methylammonium）-ethyl）7-methoxy-4-methylcoumarin）在CYP2D6的去甲基化（o-demethylation）作用下，转化为AMHC羟基香豆素（3（2（N,N-diethyl-N-methyl ammonium）-ethyl）7-hydroxy-4-methylcoumarin）后荧光峰值的变化（激发波长405nm，散发波长460nm），来定量测定细胞色素P450酶2D6的活性。其反应系统为：