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ELISA检测试剂盒的检测速度和灵敏度

2015年05月04日 10:16:30人气:575来源:上海通蔚生物科技有限公司

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【资料简介】

    ELISA检测试剂盒试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。ELISA检测试剂盒的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。

    此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。因为酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,ELISA检测试剂盒酶标记的抗原或抗体既留存其免疫学活性,又留存酶的活性。在选购酶标仪的时候,我们会首先面临一个选择,滤光片还是光栅?酶标仪主要分为滤光片型和光栅型,分别以两种不同方式生成特定波长的激发光,一种是通过滤光片,一种是通过单色器(包括光栅和棱镜)。对于我们使用者来说,这两种酶标仪究竟有何区别呢?

    因此滤光片型酶标仪一般要比光栅型酶标仪灵敏。此外,滤光片能够实现快速的波长转换,很适合离子通道比率分析以及双信号快速动力学分析等。滤光片的配置决定了酶标仪所能使用的波长,我们更改实验波长就是在切换滤光片。ELISA检测试剂盒滤光片型酶标仪一般要比光栅型便宜一些,如果我们需要的波长比较固定,对灵敏度又有较高要求,那么滤光片型酶标仪无疑是*选择。若是日后想要应用其他波长,还需另外购买滤光片,要是需添置的波长多就不大合算了。所以在我们出手之前一定要先想好未来可能进行的各项研究,谋定而后动。
     目前市面上的光栅型酶标仪其实比滤光片型更为普遍,这是因为光栅可以灵活设置波长,就算临时开展新研究也不用专门去买滤光片。而且如果我们要用未知染料进行检测,或是需要自定义波长和光谱扫描,就只能选光栅型酶标仪。此外,光栅在近紫外区的检测效率也更高(如色氨酸荧光检测)。zui先推出光栅型酶标仪的是MD公司(Molecular Devices),ELISA检测试剂盒MD酶标仪采用一个光栅和一个滤片滤光的单光栅系统。后来又出现了两个光栅组成的滤光系统,例如PE、TECAN、Thermo、BioTek等公司的一些产品,这类系统由于激发和发射各用两个光栅也被称为四光栅系统。
总的来说,如果实验室应用很多需要多种波长,那么选择灵活方便的光栅型酶标仪准没错。若是应用比较单一但对灵敏度要求高,物美价廉的滤光片型酶标仪就相当贴心。此外,还有BioTek公司的Hybrid Technology系统,该系统将滤光片和单色器组合起来,想用滤光片时选滤光片,想用光栅时选光栅,就是这么简单。
适合的才是的
    不论我们买什么,适合自己的才是的,选择酶标仪时也是如此。酶标仪性能指标包括测定波长范围、滤光片配置、检测速度、吸光度范围、线性范围、分辨率、准确度、精密度等。
对于一般生命科学实验室来说,酶标仪主要可用于基因表达、信号传导、ELISA、蛋白和核酸定量、细胞活性分析和免疫分析。如果要进行细胞学实验,ELISA检测试剂盒酶标仪一般要能够底部读取、微孔板扫描、并支持孵育和摇晃。而要做高通量筛选的实验室,就需要考虑到。高通量筛选可能涉及到特殊筛选溶液、更低的检测限以及大量微孔板。在选择酶标仪时除了要关注可靠性、灵敏度和一致性以外,能否对微孔板所有孔进行同时检测也是不可忽视的考量因素。

上海通蔚生物科技有限公司作者

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