植物3-羟-3-甲戊二酰辅酶A试剂盒说明书

【资料简介】

主要用途

 植物3-羟-3-甲戊二酰辅酶A（HMG-COA）还原酶活性直接光度法定量检测试剂是一种旨在运用3-羟-3-甲戊二酰辅酶A作为底物，在还原酶的催化下，还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）氧化后吸光峰值的降低，即采用光度法来测定植物裂解样品中酶活性的而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种植物组织，包括种子（seed）、叶片（leaf）、根（root）、胚胎叶（cotyledon）、上胚轴（epicotyl）等裂解悬液、微粒体，或纯化酶样品3-羟-3-甲戊二酰辅酶A（HMG-COA）还原酶的活性检测，以及抑制剂筛选。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。

技术背景

甲戊二羟酸通路（mevalonate pathway），又称为3-羟-3-甲戊二酰辅酶A（HMG-COA）还原酶通路或甲戊二羟酸依赖性通路，是所有高等真核生物和许多细菌具有的重要的细胞代谢通路，用于体内产生二甲基丙烯焦磷酸（dimethylallyl pyrophosphate；DMAPP）和异戊二烯焦磷酸（isopentenyl pyrophosphate；IPP）作为生物大分子合成的基础，包括蛋白质异戊二烯化、细胞膜维护、激素合成、蛋白固着、蛋白糖化等。3-羟-3-甲戊二酰辅酶A还原酶（3-hydroxy-3-methyl-glutaryl-CoA reductase；HMGR；EC1.1.1.34）是控制甲戊二羟酸通路的关键的酶，调节胆固醇和类异戊二烯脂分子的产生。HMG-COA还原酶位于内质网膜上，含有8个跨膜结构域，其中活性结构域在细胞浆里。HMG-COA还原酶是许多降脂药物的靶标，包括lovastatin （Mevacor）、atorvastatin （Lipitor）、pravastatin（Pravachol）和simvastatin（Zocor）。在植物组织中，HMG-COA还原酶位于质体、线粒体和内质网上，含有2个跨膜结构域，组织发育、光照、病原菌感染、创伤等将诱导HMG-COA还原酶活性增加。在HMG-COA还原酶的催化下，将4个电子的3-羟-3-甲戊二酰辅酶A（HMG-COA）还原为甲戊二羟酸（mevalonate），同时产生还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（reduced nicotinamide adenine dinucleotide phosphate；NADPH）被氧化为氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（oxidized nicotinamide adenine dinucleotide phosphate；NADP），其氧化后的吸光峰值变化（340nm 波长），来定量分析3-羟-3-甲戊二酰辅酶A（HMG-COA）还原酶的活性。3-羟-3-甲戊二酰辅酶A（HMG-COA）还原酶反应系统为：