微生物固体培养实验

【资料简介】

实验材料    细菌
试剂、试剂盒    胰化蛋白胨酵母提取物氯化钠NaOH
仪器、耗材    培养瓶玻璃棒离心管摇床
实验步骤    
1.  在3个无菌培养试管中各加人5 ml LB培养液，并标上序号1、2、3。

2.  吸取5 μl 细菌培养液加入1号试管中振荡揺匀。

3.  接着从1号试管吸5 μl 稀释液加入 2号试管振荡摇匀。

4.  从2号试管吸5 μl 稀释液加入3号试管振荡摇匀，每次都使用新的吸头。
 
5.  从每个试管中分别取100 μl 菌液涂布于LB平皿上，并且做好记号，待平板干后于 37℃培养。
 
6.  计算每亳升细菌细胞数：细菌细咆数/ml=10×菌落数×稀释倍数。

7.  包裹好平板保存于4℃以备进一步实验用。
实验材料    细菌
仪器、耗材    接种环培养皿
实验步骤    
一、实验准备
 
1.  接种环
 
（1）灭菌，将接种环置于本生灯火焰中灼烧直至变红。
 
（2）冷却，将接种环触碰无菌琼脂平板的表面直至其不发出咝咝声。

二、实验步骤 

1.  采用无菌操作技术，用接种环将接种物从平板的一侧开始划线。
 
2.  重新消毒接种环，从*划线处将样品划线至平板的其佘部分，重复划线直至覆盖整个平板。

3.  于37℃培养直至长出单菌落。
 
4.  如果要从很多的菌液中分离单克隆，可以将平 板分为4、6或8小份，在每个小份中划出单克隆。

实验材料    细菌
仪器、耗材    涂布棒培养箱培养皿
实验步骤    
一、实验准备
 
1.  涂布棒
 
（1）加热并弯曲一支直径4 mm 的玻璃管或巴斯德吸管制备涂布棒。

（2）灭菌，将涂布棒的三角部分浸没于酒精中，从容器中取出后再通过灯焰，点燃其上的乙醇。
 
（3）待涂布棒上的火焰熄灭后，将其触碰无菌琼脂平板的表面使其冷却。
 
 
 
二、实验步骤 

1.  吸取0.05~1 ml 培养物至一只干的平板上。
 
2.  用涂布棒作圆周运动将培养液涂布均匀，或用涂布棒的边缘在平板的表面划光栅图案 （一系列平行线）然后转动平板并与已涂布的平行线成直角重复涂布。

3.  平板盖微开至平板*晾干，于37℃培养。