血浆游离血红蛋白测定

【资料简介】

实验原理
 
血红蛋白具有类过氧化物酶活性，可催化H2O2释放新生态氧，使邻甲联苯胺氧化发生颜色变化，由无色zui终变为蓝紫色。根据显色深浅与标准进行比较，可测出其含量。
 
实验方法
 
材料：
 
1．2g/L邻甲联苯胺溶液
 
2．1%H2O2
 
3．10%醋酸溶液
 
4．分光光度计
 
方法：
 
1.抽取静脉血2-3ml，*抗凝，离心分离血浆。
 
2．按下表进行操作，用分光光度计，波长为530nm，以空白管调零，测定测定管的吸光度。

试剂 （ml）	测定管	空白管
2 g/L邻甲联苯胺溶液	0.5	0.5
患者血浆	0.02	/
1% H2O2	0.5	0.5
混匀后室温放置10min
10%醋酸溶液	5.0	5.0
室温放置10min

3.计算公式
 
血浆游离Hb(mg/L)=测定管吸光度/标准管吸光度×100
 
实验结果计算
 
参考范围：0-40mg/L
 
注意事项
 
1.一切容器避免血红蛋白污染；
 
2.采血要顺利，器皿要干燥，检测血浆要新鲜，及时分离，防止人为溶血；
 
3.邻联苯胺溶液具致癌性，检测时要小心，废液要妥善处理，以免污染；
 
4.双氧水要新鲜配置，浓度要准确。