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羟自由基测试盒说明书
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| 关 键 词 | 羟自由基测试盒说明书 | ||
- 【资料简介】
羟自由基测试盒说明书 一、实验仪器:
试管、微量移液器、旋涡混匀器、37°C 恒温水浴锅,可见分光光度计(550nm)
二、适用范围:
血清(浆)、各种组织匀浆液、中性白细胞、某些药物、部分植物、培养细胞、培养上清液等。
三、测定意义:
羟自由基(·OH)是一种氧化能力很强的自由基,其性质很活泼,氧化各种有机物和无机物
的速率极快,是造成组织脂质过氧化、核酸断裂、蛋白质和多糖分解的主要因素,与机体衰老、
肿瘤、辐射孙损伤和细胞吞噬能力有关。
四、操作步骤:
标准空白管 标准管 对照管 测定管
蒸馏水(ml) 0.4 0.2 0.2
0.03%H2O2标准应用液(ml) 0.2
底物应用液(ml) 0.2 0.2
样本*(ml) 0.2
试剂三应用液(ml) 0.4 0.4 0.4 0.4
混匀,37℃反应1分钟(准确以秒表计时),从加完试剂三开始到一分钟结束,立即加
入显色剂终止反应,一次只能做一只管子。
显色剂(ml) 2 2 2 2
混匀,室温放置 20 分钟后,1cm 光径, 550nm,蒸馏水调零,测各管吸光度值。
五、计算公式:
1、血清计算公式:
1
(/ ) (8 824 / )
ml
Uml mmol L
?
=×× ×
?
抑制羟自由基 样本测试前 标准品浓度 对照OD值 测定OD值
标准OD值 空白OD值 取样量 能力 稀释倍数 .
2、组织计算公式:
(/ ) (8 824 / ) g Umgprot ml mmol L
? ? ?
=×÷ × ? ?
? ? ?
抑制羟自由基 取样量 标准品浓度 待测样本蛋白浓度 对照OD值 测定OD值
标准OD值 空白OD值 能力 () . ( prot/L)
3、溶血液计算公式:
( )
1
8 824 / (/ )
OD OD ml
mmol L OD OD Uml
?
=× ×
?
标准品浓度 抑制羟自由基 样本测试前 对照 值 测定 值
. 标准 值 标准空白 值 取样量 能力 的稀释倍数 ×
4、产生羟自由基能力的计算公式:
( )
1
8824 / (/ )
OD OD ml
mmol L OD OD Uml
?
=× ×
?
标准品浓度 样本测试前 产生羟自由基 测定 值 对照 值
. 标准 值 标准空白 值 取样量 的稀释倍数 能力 ×
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