促黄体生成激素放免试剂盒操作步骤

【资料简介】

促黄体生成激素放免试剂盒操作步骤【成份】

［药盒组成及配制］ 50管 100管 200管

1.碘[¹²⁵I]-LH(红) 1瓶 1瓶 2瓶

2.LH校准品 1套 1套 1套

LH校准品(7瓶/套)浓度分别为：(0、5、10、25、50、100、200)mIU/mL。

3.LH抗体(兰) 1瓶 1瓶 2瓶

4.质量控制样品 1套 1套 1套

5.分离试剂 1瓶 1瓶 2瓶

6.药盒使用说明书 1张 1张 1张

促黄体生成激素放免试剂盒操作步骤［操作方法］

1.样品采集：取全血，分离血清，备用。(2～8)℃放置可保存2周；若冰冻保存，可放置五周。脂血或溶血样品影响测定结果。

2.实验方法：试管编号，按下表程序操作。

操作表 单位：μL

管别	校准品	样品	蒸馏水	抗体	125I-LH	混匀，室温放置(12～16)小时。	分离剂
总T管	--	--	--	--	100		--
NSB管	200(S0)	--	100	--	100		500
S0管	100	--	--	100	100		500
S1管～S末管	100	--	--	100	100		500
血样品管	--	100	--	100	100		500

混匀，室温放置15分钟，离心(3500转/分)15分钟，吸弃上清液，在放免仪上测定各管沉淀的放射性计数(cpm)。

［数据处理］

1.计算机处理：建议采用“对数计量-相对结合率的分数对数”〔log(dose)～logit(B_i/B₀)〕数学模型或四参数数学模型拟合。

2.计算、绘图法：

计算各管的百分结合率：以S₀(cpm数)为B₀，各校准管S_i(cpm数)为B_i，求各管的百分结合率。

 

⑴.线性回归：用logX～logitY回归，求出r、a、b值，样品含量可由下式计算得出。

 

⑵.绘图法：用各校准点计算的结果，在log～logit坐标纸上绘制校准曲线图，被测样品的含量可根据B_i/B₀的百分结合率从校准曲线图上查出。

［正常参考值］

各实验室应根据实验模型建立自己的动物参考值。

［技术特性］

1.灵敏度：＜0.3mIU/mL

2.测定范围：(5～200)mIU/mL

3.精密性：批内变异系数CVw＜10％，批间变异系数CVb＜15％。

［参考文献］

1.Bremnerw J:PituifaryPonadotropinsans their dosorders,Principles of endocinodosy and metabolism KL 1990,pp152-6.

2.Wu CH:Monitoring of oradation induction Fertilsteril 30:617,1978.

【性状】

液体组份应澄清，无沉淀或絮状物。

【放射性核素半衰期】

放射性核素碘[¹²⁵I]半衰期(T_1/2)=60天

促黄体生成激素放免试剂盒操作步骤【适应症】

［测定原理］

本药盒是利用放射免疫分析方法进行测定的。在均相竞争抑制反应中采用平衡法，对血清样品中LH的含量进行直接测定。测定中校准品、样品等中的LH与¹²⁵I-LH竞争*的LH抗体结合位。当被测样品中LH的含量高时，剩余的抗体结合位就少，从而与抗体结合的¹²⁵I-LH就少，反之亦然。利用分离试剂分离出抗原-抗体复合物，并测定复合物中的放射性计数。¹²⁵I-LH的结合量与样品中LH的含量呈函数关系，通过数据处理可求出样品中LH的含量。

［临床意义］

促黄体生长激素(LH）是由垂体前叶分泌的糖蛋白激素，其分子量大约为30000，由两条多肽链（即α和β亚单位）组成。LH的α亚单位与FSH、LH和HCG的亚单位的结构相似。β亚单位在上述激素之间是不同的，从而赋予各激素各自的生物及免疫学特性。在雌性体中，LH在卵泡期限与FSH一起促进卵泡的成熟、雌性激素的合成和分泌；促进排卵和使排卵后的卵泡转变为黄体；促进间质的生长；并促进黄体合成和孕激素与雌性激素的分泌。雄性LH促进睾丸间质细胞增生，促进其合成和分泌睾丸酮。由于LH和FSH的作用是互相协同的故二者常同时测定。LH增高见于Klinefelter综合症、Turner综合症、性腺切除后及促性腺激素产生肿瘤；减低见于西蒙氏病、席汉氏综合症、肥胖性生殖器退化综合症、垂体性侏儒、睾丸肿瘤、卵巢肿瘤、神经性厌食及使用雌激素后。

 

【注意事项】

1.所有试剂包括待测样品实验前应事先在室温下平衡20分钟，且使用前应充分摇匀。

2.不同批试剂不能混合使用，每份样品都应做双管实验。

3.本实验使用放射性核素碘[¹²⁵I](剂量为0.2μCi/mL)，故应注意放射防护。放射性废物须按放射防护条例规定处理。

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