鱼皮质醇ELISA试剂盒说明书

【资料简介】

鱼（ Fish ）皮质醇（ Cortisol ）ELISA 检测试剂盒使用说明书
检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验 （ELISA） 。 往预
先包被皮质醇（Cortisol）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准
品、HRP标记的检测抗体，经过温育并*洗涤。用底物TMB显色 ，
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色， 并在酸的作用下转化成zui终
的黄色。颜色的深浅和样品中的皮质醇（Cortisol）呈正相关。用酶
标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值） ，计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞
刺激，收集血液后，3000 转离心 10 分钟将血清和红细胞迅速小心地
分离。
2. 血浆： EDTA、 柠檬酸盐或肝素抗凝。 3000 转离心 30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心 10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量理盐水捣碎。3000 转离心 10 分钟
取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于
-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
1. 酶标仪（450nm）
2. 高精度加样器及枪头： 0.5-10uL、 2-20uL、 20-200uL、 200-1000uL
3. 37℃恒温箱
操作注意事项
1. 试剂盒保存在 2-8℃，使用前室温平衡 20 分钟。从冰箱取出的
浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶*溶解
后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中， 密封 （低温干燥） 保存。
3. 浓度为 0 的 S0 号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明
书操作时样本已经稀释 5 倍，zui终结果乘以 5 才是样本实际浓度。
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀

详细说明书见附件！

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