大鼠α颗粒膜蛋白（GMP-140）ELISA试剂盒使用方法

【资料简介】

检测范围：                                                          48T

0.5μg/L -20μg/L

 

使用目的：

    本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本α颗粒膜蛋白（GMP-140）含量。

实验原理

       本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠α颗粒膜蛋白（GMP-140）水平。用纯化的大鼠α颗粒膜蛋白（GMP-140）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入α颗粒膜蛋白（GMP-140），再与HRP标记的α颗粒膜蛋白（GMP-140）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的α颗粒膜蛋白（GMP-140）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠α颗粒膜蛋白（GMP-140）浓度。

试剂盒组成

1	20倍浓缩洗涤液	20ml×1瓶	7	终止液	3ml×1瓶
2	酶标试剂	3ml×1瓶	8	标准品（40μg/L）	0.5ml×1瓶
3	酶标包被板	12孔×4条	9	标准品稀释液	1.5ml×1瓶
4	样品稀释液	3ml×1瓶	10	说明书	1份
5	显色剂A液	3ml×1瓶	11	封板膜	2张
6	显色剂B液	3ml×1/瓶	12	密封袋	1个

标本要求 

1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融

2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤

• 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

20μg/L	5号标准品	150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
10μg/L	4号标准品	150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
5μg/L	3号标准品	150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
2.5μg/L	2号标准品	150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
1.25μg/L	1号标准品	150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液