人晚期氧化蛋白产物（AOPP）elisa试剂盒使用说明书

【资料简介】

人晚期氧化蛋白产物（AOPP）elisa试剂盒工作原理
本试剂盒采用双位点夹心酶联免疫吸附法（ELISA），测定样品中人晚期氧化蛋白产物（AOPP）的水平。向预先包被人晚期氧化蛋白产物（AOPP）抗体的酶标孔中加入标准品、待测样本和HRP标记的晚期氧化蛋白产物（AOPP）抗体，经过温育和洗涤，去除未结合的组分，然后再加入底物A、B，产生蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅与样品中人晚期氧化蛋白产物（AOPP）的浓度呈正相关。
注意事项
． 从2-8℃取出的试剂盒，在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2． 各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差
3． 建议所有标准品、样本都做双份检测。
4． 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
5． 为避免交叉污染，要避免重复使用手中的吸头和封板膜。
6． 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
7． 底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。
人晚期氧化蛋白产物（AOPP）elisa试剂盒洗板方法
手工洗板方法：甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将稀释后的洗涤液至少0.35ml注入孔内，浸泡-2分钟。根据需要，重复此过程数次。
自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中
标本要求
．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
2．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
操作程序
． 分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准品孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品孔中加入标准品50μl；在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品0μl（样品zui终稀释度为5倍）。每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。轻轻晃动混匀，37℃温育60分钟。
2． 弃去液体，甩干，每孔加满稀释后洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。如此重复5次，拍干。
3． 每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色5分钟.
4． 取出酶标板，每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
5． 测定：以空白孔调零，在450nm波长下测量各孔的吸光度值（OD值）。测定应在加终止液后5分钟以内进行。
6． 人晚期氧化蛋白产物（AOPP）elisa试剂盒根据标准品的浓度及对应的OD值计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样品的OD值在回归方程上计算出对应的样品浓度。也可以使用各种应用软件来计算。应记住由于样品稀释了的，其实际浓度应该乘以总稀释倍数。