当前位置：上海雅吉生物科技有限公司>>技术文章>>细胞表面标记实验步骤
1. 分离外周血单个核细胞（PBMC），洗涤后用含10 ％FCS PMI1640调整细胞浓度约5×106 /ml
2. 自制制片机上制片，充分干燥
3. 用含丙酮-福尔马林固定液中固定30 秒钟
4. 自来水、蒸馏水依次冲洗
5. 用TBS稀释特异性McAb或阴性对照抗体（1∶50～500），每片加30～50 μl
6. 室温湿盒孵育30 min，或4 ℃冰箱湿盒中
7. 充分用TBS冲洗后，加1∶50羊（兔）抗鼠IgG（GAM或RAM IgG）30～50 μl
8. 室温湿盒孵育30 min
9. TBS冲洗后加碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶（1∶2000）复合物（APAAP）
10. TBS冲洗后可重复叠加GAM或RAM IgG和APAAP2 次，每次孵育10 min
11. 冲洗后底物液显色10～15 min
12. 自来水冲洗，苏木精衬染，光镜下观察
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