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1.包被过程(注意设置空白对照,阴性对照):将所用抗原用包被稀释液稀释到适当浓度(一般所需抗原包被量为每孔20-200μg),每孔抗原加入100μl,置37℃,4h,或4℃,24h;弃去孔中液体.(为避免蒸发,板上应加盖或将板平放在底部有湿纱布的金属湿盒中)2.封闭酶标反应孔:5%小牛血清置37℃封闭40min.封闭时将封闭液加满各反应孔,并去除各孔中的气泡,封闭结束后用洗涤液满孔洗涤3遍,每遍3min.洗涤方法:吸干孔内反应液,将洗涤液注满板孔,放置2min略作摇动,吸干孔内液,倾去液体后在吸
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参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:①引物长度:15-30bp,常用为20bp左右。②引物扩增跨度:以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易
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ELISA试剂盒变质是ELISA实验中比较常见的问题,那么,ELISA试剂盒变质是因为什么呢?是什么影响了ELISA试剂盒质保?一旦变质会有什么影响呢?今天劲马小编为大家详细分析下。Ⅰ、方法学的影响ELISA测定模式包括以下几种:双抗体夹心法、间接法、双抗原夹心法、IgM抗体捕捉法、竞争抑制法,其中竞争抑制法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作时差所引起的bu公平竞争等因素的影响,结果重复性较差,质量较难控制。Ⅱ、试剂因素不同批次的ELISA试剂在制作过程中很难保证质量*一致,即使是通过批批
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原代细胞(primaryculturecell)是指从机体取出后立即培养的细胞。有人把培养的第1代细胞与传10代以内的细胞统称为原代细胞培养。原代细胞不仅广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究,如蛋白质组学、基因组学、细胞株(系)研究、DNA,RNA和遗传学研究等。一、冻存原代细胞的培养1.将一管细胞从液氮罐中取出,注意保护手和眼睛。2.将冻存管快速的放入37℃水浴中,轻轻握住并旋转,直到管内物体*融化。3.将冻存管立即从水浴中拿出,擦干,转入无菌环境。4.用70%的酒精冲洗冻存管,然后擦
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有很多客户向我们咨询ELISA实验后如何进行曲线制作?那么对于那么多的曲线计算公式,该如何选择*的拟合方程呢?今天上海劲马的技术员就给大家总结下:ELISA曲线拟合的那些事。我们一般可以用软件绘制也可以通过excel进行制作。按照科学分析方法,如果存在奇异点或者污点,直接采用线性分析不是很好,要对拟合曲线的几个点进行取舍,同时也可以改用双对数直线拟合或者四参数曲线拟合。那么常用的曲线拟合回归方程主要为以下几种:第yi种是直线回归:直线回归是简单的回归模型,也是zui基本的曲线拟合回归分析方法,将
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一、血清的制备方法问题。1、问:我的实验需要自己制备一些血清用于培养细胞,有没有人知道用于培养细胞的血清需要怎样的制备过程?答:自己制备血清当心污染啊。如果无菌条件好的话,用静置析出方法就行。2、问:一般我们用得胎牛血清用前还要灭活,我想用大鼠的血,不知道要不要灭活?答:你直接把采来的血液在离心管里4℃过夜,离心,取上清,在无菌过滤,也可灭活,然后分装冻存,用时再配。3、问:如果灭活会不会对血清中的一些因子有损伤?答:加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件,刺激平滑肌收缩,细胞和血小板
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一、参数规格【产品名称】:劲马产品羊口疮病毒(ORFV)ELISA试剂盒使用说明书【供货期】:1-3天(现货供应)【产品用途】:被测样品定性定量分析【产品规格】:96T/48T(两种规格)【检测方法】:酶免法/酶联免疫法(ELISA)【保存条件】:2-8℃【产品性状】:液体盒装【产品价格】:(含税含运费,我们全程提供ELISA实验技术指导和ELISA试剂盒免费代测)【销售优势】:价格行业优势、质量可靠、如果出现客观质量问题包换退【待检样本】:体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房
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1、问:加到培养基中的血清必须灭活吗?答:不是必须的,看做什么实验了。2、问:四季青胎牛血清灭活是56℃30分钟吗?答:如果用于培养大多数的肿瘤细胞,血清一般是不需要灭活的,这样可以有效保存血清中的生长因子。但是如果用于培养一些表面具有补体受体的细胞,如内皮细胞,血清是需要灭活,一般是56℃,30min。3、问:我要做滋养细胞培养,胎牛血清要灭活吗?答:进口的一般都已灭活,国产的不一定,还是灭活一下再用较安全。4、问:我用病毒上清转染细胞,培养用的血清需要灭活吗?因为血清中可能有些补体和抗体,是