商品属性：
产品名称：人肺腺癌细胞：SPC-A-1
货号：BJ-X96537
规格：1×10⁶cells/T25培养瓶
分类：细胞系
商品介绍：

细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：产品仅用于科研
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

DiOC6(3) 碘化物100mg  DNA 电泳分子量标准 (100-1500 bp)50 次

ER-Tracker Red( 内质网红色荧光探针 )20μL  DNA 采样拭子 50 支

Fluo-3AM( 钙离子荧光探针 )250μL  DNA 包被溶液100mL

Fluo-3，五铵盐1mg  DNA UV 防护剂3g

Fluorescein-5-maleimide25mg  DNA Shuffling 试剂盒10 次
大鼠 Klotho elisa检测试剂盒

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仓鼠组织K(cath-K)elisa检测试剂盒

仓鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)elisa检测试剂盒

仓鼠脂氧素A4(LXA4)elisa检测试剂盒
人肺腺癌细胞：SPC-A-1大鼠Smad同源物3(Smad3)elisa检测试剂盒

大鼠Smad同源物7(Smad7)elisa检测试剂盒

大鼠Smoothelin蛋白(SMTN)elisa检测试剂盒

大鼠SPARC样蛋白1(SPARCL1)elisa检测试剂盒

大鼠Syndecan-1/CD138(SDC1)elisa分析检测试剂盒
操作要点：
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。