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上海邦景实业有限公司
主营产品： 进口elisa试剂盒，细胞株，细胞系，菌种 |
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更新时间：2023-01-19 09:49:21浏览次数：271
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操作要点：
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
商品属性：
产品名称：人结肠腺癌细胞：SW1116
货号：BJ-X96625
规格：1×10⁶cells/T25培养瓶
分类：细胞系
商品介绍：
名称 SW1116 (人结肠腺癌细胞) 种属 人类 年龄（性别） 男性，73岁 组织来源 结肠腺癌Ⅲ期 生长特性 贴壁细胞 细胞形态 上皮细胞样 背景描述 SW1116细胞CSAp阴性(CSAp-)、结肠抗原3阴性；SW1116细胞角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性。癌基因检测表明，SW1116细胞c-myc、K-ras、H-ras、myb、sis和fos的表达呈阳性，未检测到癌基因N-myc和N-ras的表达。SW1116还表达肿瘤特异的核基质蛋白CC-4、CC-5和CC-6。 生物安全等级 1 生长培养基 Leibovitz's L-15＋10% FBS＋1% P/S 推荐传代比例 1:3-1:4 推荐换液频率 2~3次/周 倍增时间 ~96-144小时 冻存条件 冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO 温度：液氮 培养条件 气相：空气，100% 温度：37℃ 致瘤性 Yes, in nude mice. 抗原表达情况 Blood Type O, Rh+ 基因表达情况 carcinoembryonic antigen (CEA) 2654 ng/10^6 cells/10 days; keratin 注意事项 1、该细胞推荐使用Leibovitz's L-15培养基进行培养，Leibovitz's L-15不可以通入二氧化碳，会产生细胞毒性； 2、如您没有无二氧化碳的培养箱，可使用DMEM替代Leibovitz's L-15，使用DMEM培养基时即可正常通入5%二氧化碳； 2、配套专用培养基默认Leibovitz's L-15配置，如需DMEM配方，请联系销售下单备注更改。 保藏机构 ATCC; CCL-233 ECACC; 87071006 |
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：产品仅用于科研
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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