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上海邦景实业有限公司
主营产品： 进口elisa试剂盒，细胞株，细胞系，菌种 |
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更新时间：2023-02-10 09:54:45浏览次数：175
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商品介绍：
名称 NCI-H157 (人非小细胞肺腺癌细胞)
别称 NCl-H157; NCI H157; H157; H-157; NCI-157
种属 人类
年龄（性别） 男性，59岁
组织来源 肺
生长特性 贴壁
细胞形态 多角形
生物安全等级 1
生长培养基 RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S
推荐传代比例 1:2-1:3
推荐换液频率 2~3次/周
倍增时间 ~54-90 hours
冻存条件
冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
温度：液氮
培养条件
气相：空气，95%；CO?，5%
温度：37℃
保藏机构 ATCC; CRL-5802 - Discontinued KCB; KCB 200814YJ KCLB; 90157 - Discontinued
产品名称 | 规格 | 分类 | 货号 |
1×10⁶cells/T25培养瓶 | 细胞系 | BJ-X96706 |
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备
记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
5.研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广，如细胞学、免疫学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等；
适用的对象范围广，从低等动物到高等动物，一种动物的不同年龄阶段以及不同组织，都可进行有针对性的研究。
6.研究的费用相对较经济
可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。
实验报告：
一、分离与培养： 1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小； 2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置； 3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化； 4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养； 5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
| 二、免疫荧光鉴定： 1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min； 2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min； 4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜； 5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h； 6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。 |
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
RIPA 裂解液 ( 弱 )100mL Sodium orthovanadate( 0酸酯酶抑制剂 )2g
NP-40 裂解液100mL Sodium Butyrate(HDAC 抑制剂 )1g
动植物总蛋白微量提取试剂盒50 次 SOD( 抗氧化酶 )65KU
动植物膜蛋白微量制备试剂盒50 次 SNP(NO 供体 )1g
动物细胞核蛋白微量制备试剂盒25 次 SMT(iNOS 抑制剂 )100mg
FITC标记的溶血磷脂酰基转移酶抗体
FITC标记的长链脂肪酸A连接酶1/2抗体
FITC标记的过氧化物酶酰基A氧化酶2抗体
FITC标记的过氧化物酶酰基A氧化酶1抗体
FITC标记的乙酰A酰基转移酶1抗体
人非小细胞肺腺癌细胞：NCI-H157大鼠蛋白聚糖4(PRG4)elisa分析检测试剂盒
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