乙酰danjian酯酶，也称为AChE，是一种降解（通过其水解活性）神经递质乙酰danjian，产生danjian和乙酸酯基的酶。它主要在中枢神经系统的神经肌肉接头和danjian能突触中发现，其活性用于终止突触传递。AChE具有很高的催化活性-每个AChE分子每秒降解约5000个乙酰danjian分子。乙酰danjian酯酶也存在于红细胞膜上，构成Yt血型抗原。乙酰danjian酯酶以多种分子形式存在，它们具有相似的催化特性，但它们的寡聚体组装和与细胞表面的附着方式不同。该Amplite™荧光乙酰danjian酯酶测定试剂盒为检测AChE活性提供了zui灵敏的方法。该试剂盒使用我们出色的Thiolite Green™来定量AChE水解乙酰danjian产生的danjian。Thiolite Green™的荧光强度与巯基danjian的形成成正比，因此与AChE活性成正比。

组件

1. 准备AChE标准品和/或AChE测试样品（50 µL）

2. 添加AChE工作溶液（50 µL）

3. 在室温下孵育10-30分钟

4. 监测Ex / Em = 490/525 nm的荧光强度

重要说明
开始实验之前，请在室温下解冻所有试剂盒组件。

细胞样品的制备

储备溶液的制备

除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。避免重复冻融循环。

1. Thiolite™Green储备溶液（200X）：
将50 µL DMSO（组分E）添加到Thiolite™Green（组分A）小瓶中，制成200X Thiolite™Green储备溶液。

2.乙酰硫danjian储备溶液（500X）：
将0.6 mL的ddH ₂ O加入小瓶的乙酰硫danjian（组分C）中。

3.乙酰danjian酯酶标准储备液：
将100 µL 含0.1％BSA 的ddH ₂ O加入小瓶乙酰danjian酯酶标准品（组分D）中，制成50 U / mL乙酰danjian酯酶标准品溶液。

配制标准溶液

为了方便起见，请使用我们的系列稀释计

将20 µL的50 U / mL乙酰danjian酯酶标准溶液加到980 µL的测定缓冲液（组分C）中，以生成1000 mU / mL的乙酰danjian酯酶标准溶液。取1000 mU / mL乙酰danjian酯酶标准溶液（1:10）得到100 mU / mL乙酰danjian酯酶标准溶液（AS7）。然后进行1：3连续稀释以获得剩余的连续稀释的乙酰danjian酯酶标准品（AS6-AS1）。注意：稀释的乙酰danjian酯酶标准溶液不稳定，应在4小时内使用。

准备工作溶液

将10μL乙酰硫danjian储备溶液（500X）和25μLThiolite™Green储备溶液（200X）加入5 mL测定缓冲液（组分B）中，使总体积为5.03 mL乙酰danjian酯酶（AChE）工作溶液。注意： AChE工作溶液不稳定，需要在30分钟内使用。远离光线。