danjian及其代谢产物在细胞膜的结构完整性和信号传导以及danjian能神经传递（乙酰danjian合成）中起着重要作用。它是通过其代谢产物*基ganansuan参与S-腺苷jialiuansuan合成途径而获得的甲基基团的主要来源。danjian缺乏症可能导致肝脏疾病，动脉粥样硬化以及可能的神经系统疾病。尽管danjian在中枢神经系统中作为乙酰danjian和膜磷脂酰danjian的前体具有重要意义，但对danjian在精神疾病中的作用却鲜有研究。该Amplite™danjian定量试剂盒提供了灵敏的danjian定量方法之一。该试剂盒使用Amplite™Red量化danjian的浓度，这与danjian氧化酶介导的酶偶联反应中过氧化氢的产生有关。danjian的量与在酶偶联反应循环中形成的过氧化氢的浓度成比例。在存在过氧化物酶的情况下，Amplite™Red的荧光强度与过氧化氢的形成成比例，该过氧化氢转化为danjian的浓度。该测定可以容易地用荧光酶标仪读取。或者，也可以使用吸收酶标仪在〜570 nm处读取测定值。Amplite™Red的荧光强度与过氧化氢的形成成比例，该过氧化氢转化为的danjian浓度。该测定可以容易地用荧光酶标仪读取。或者，也可以使用吸收酶标仪在〜570 nm处读取测定值。Amplite™Red的荧光强度与过氧化氢的形成成比例，该过氧化氢转化为danjian的浓度。该测定可以容易地用荧光酶标仪读取。或者，也可以使用吸收酶标仪在〜570 nm处读取测定值。

1. 准备并添加标danjian准品和/或测试样品（50 µL）

2. 准备并添加danjian测定工作溶液（50 µL）

3. 在室温下孵育15-60分钟

4. 监测Ex / Em = 540/590 nm时的荧光强度

重要说明
开始实验之前，请在室温下解冻所有试剂盒组件。

储备溶液的制备

除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。避免重复冻融循环。

1. Amplite™Red储备液（250X）：
将40 µL DMSO（组分E）添加到Amplite™Red底物（组分A）的小瓶中。储备溶液应及时使用。应将所有剩余的溶液等分，并在-20  ^o C重新冷冻。注意：避免重复冻融循环。注意：在硫醇（例如二硫苏糖醇（DTT））存在下，Amplite™Red底物不稳定。反应中DTT的终浓度应不高于10 µM。Amplite™Red底物在高pH（> 8.5）下也不稳定。因此，反应应在pH 7-8下进行。建议使用提供的测定缓冲液（pH 7.4）。

2.danjian标准储备液（50 mM）：
将400 µL ddH ₂ O加入danjian标准液（组分C）的小瓶中，并充分混合。注意：未使用的danjian储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在-20 ^o C下储存。

配制标准溶液

为了方便起见，请使用我们的系列稀释计

将20 µLdanjian标准储备液（50mM）添加到980 µL测定缓冲液（组分D）中，生成1000 µM标准溶液。注意：  稀释的danjian标准溶液不稳定，应在4小时内使用。将30 µL的1000 µM标准溶液加到970 µL的测定缓冲液（组分D）中，以生成30 µMdanjian标准溶液，然后进行1：3系列稀释，以得到10、3、1、0.3、0.1、0.03和0 µMdanjian标准。（请参阅标准溶液制备中的链接）

准备工作溶液

danjian测定工作溶液：
将5 mL测定缓冲液（组分D）添加到danjian探针瓶（组分B）中，并充分混合。在danjian探针中加入20 µL Amplite Red™储备溶液（250X）。