天冬氨酸转氨酶(AST),也称为血清guansuan草酰乙酸转氨酶(GOT),是转氨酶家族的成员。它催化天冬氨酸和guansuan之间α-氨基的可逆转移,并且是氨基酸代谢中的重要酶。AST存在于许多身体组织中,例如肝脏,心脏,肌肉,肾脏,大脑。在健康受试者中,血清AST水平较低。但是,当细胞受损时,例如急性和慢性肝炎,阻塞性黄疸,肝癌,心肌梗塞,AST可能会渗入血液,AST水平会显着升高。因此,测定血清AST水平具有重要的临床和诊断意义。Amplite™荧光天冬氨酸氨基转移酶(AST)分析试剂盒提供了一种快速灵敏的方法来测量各种生物样品中的AST。天冬氨酸转氨酶催化天冬氨酸和α-酮戊二酸与草酰乙酸和guansuan的反应。通过酶联反应循环产生红色荧光产物来测量产物L-guansuan。信号可以通过荧光酶标仪读取。借助Amplite™荧光天冬氨酸氨基转移酶测定试剂盒,我们在100 µL反应体积中仅检测到2 mU / mL AST。该测定法是鲁棒的,并且可以容易地适用于多种应用。通过酶联反应循环产生红色荧光产物来测量产物L-guansuan。信号可以通过荧光酶标仪读取。借助Amplite™荧光天冬氨酸氨基转移酶测定试剂盒,我们在100 µL反应体积中仅检测到2 mU / mL AST。该测定法是鲁棒的,并且可以容易地适用于多种应用。通过酶联反应循环产生红色荧光产物来测量产物L-guansuan。信号可以通过荧光酶标仪读取。借助Amplite™荧光天冬氨酸氨基转移酶测定试剂盒,我们在100 µL反应体积中仅检测到2 mU / mL AST。该测定法是鲁棒的,并且可以容易地适用于多种应用。
荧光酶标仪 | |
激发 | 540纳米 |
发射 | 590纳米 |
隔断 | 570纳米 |
推荐板 | 纯黑色 |
组分A:AST酶混合物 | 1瓶(冻干粉) |
组分B:AST酶缓冲液 | 1瓶(10毫升) |
成分C:NAD | 1个小瓶 |
成分D:AST阳性对照 | 1小瓶(10 U,冻干粉) |
准备AST标准液或测试样品(50 µL)
加入AST工作溶液(50 µL)
在37°C下孵育20-30分钟或在室温下孵育60分钟
监测Ex / Em = 540/590 nm时的荧光增加
重要说明
在开始实验之前,在室温下解冻A组分和B组分各一瓶。
储备溶液的制备
除非另有说明,否则所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。避免重复冻融循环。
1. AST标准溶液(100 U / mL):
将100 µL DPBS缓冲液添加到AST阳性对照(组分D)中,制成100 U / mL AST标准溶液。
配制标准溶液
为了方便起见,请使用我们的系列稀释计
将3 µL 100 U / mL AST标准溶液加到含0.1%BSA的997 µL DPBS缓冲液中,以生成300 mU / mL AST标准溶液(AST7)。取300 µL 300 mU / mL AST标准溶液进行1:3连续稀释,以获得AST标准品(AST6- AST1)的连续稀释液。注意: AST标准仅用于阳性对照,不应作为酶活性的定量标准。
准备工作溶液
1. NAD溶液(100X):
将100 µL ddH 2 O加入NAD小瓶(组分C)。
2. AST酶混合物溶液:
将10 mL AST分析缓冲液(组分B)添加到AST酶混合物(组分A)瓶中,并充分混合。
3. AST工作溶液:
将整个小瓶的100X NAD溶液(从1开始)添加到AST酶混合物溶液(从2开始)中,以得到AST工作溶液。注意:此AST工作解决方案足以用于两个96孔板。在室温下不稳定,应在2小时内及时使用。或者,可以通过将200 µL H 2 O加入组分A的瓶子中制成50倍的AST酶混合物储备溶液,然后通过将储备溶液与测定缓冲液(组分B)和100X NAD混合来制备AST工作溶液。按比例求解。
13800 | Amplite™荧光法天mendongansuan转氨酶(AST)检测试剂盒 | Amplite™ Fluorimetric Aspartate Aminotransferase (AST) Assay Kit | 200 Tests |
13801 | Amplite™比色法天mendongansuan转氨酶(AST)检测试剂盒 | Amplite™ Colorimetric Aspartate Aminotransferase (AST) Assay Kit | 200 Tests |
13802 | Amplite™荧光法bingansuan转氨酶检测试剂盒 | Amplite™ Fluorimetric Alanine Aminotransferase Assay Kit | 200 Tests |