中国科学院 | 分子量 | 激发(nm) | 发射(nm) |
169332-61-0 | 675.64 | 341 | 441 |
Ac-DEVD-AMC是caspase 3的荧光底物,caspase 3是一种蛋白酶,当细胞暴露于凋亡条件下时会被快速激活,并裂解聚(ADP-核糖)聚合酶。
协议范例
乍看上去
重要笔记
重要的是要存放在<-15°C的环境中,并应存放在阴凉处。
自收到之日起12个月内可以使用。
程序
以下协议仅提供指导,应根据您的特定需求进行修改。
使用AMC,AFC,pNA,R110和ProRed底物的常规解决方案胱天蛋白酶测定
- 在DMSO中准备10 mM的储备溶液。
- 如下准备2X半胱天冬酶底物(50 µM)分析溶液:50 µL底物原液,100 µL DTT(1M),400 µL EDTA(100 mM),10 mL Tris Buffer(20 mM),pH = 7.4。
- 将等体积的半胱天冬酶标准品或样品与2X半胱天冬酶底物测定溶液混合,并在室温下孵育至少1小时。
- 使用荧光酶标仪读取荧光,或使用酶标仪读取吸光度。
使用细胞渗透性FMK Caspase探针的细胞Caspase测定
- 在DMSO中准备2-5 mM的储备溶液。
- 根据需要处理细胞。
- 通过用20 mM Hepes缓冲液(HHBS)在Hanks中稀释DMSO储备溶液(来自步骤2.1),制备2X渗透性半胱天冬酶底物(20 µM)分析溶液。
- 将等体积的处理过的细胞与2X半胱天冬酶底物测定溶液混合(来自步骤2.3),并在37°C,5%CO 2的培养箱中孵育细胞至少1小时。
- 用HHBS清洗细胞至少一次。
- 通过流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。
使用细胞渗透性FMK Caspase探针进行细胞半胱天冬酶测定(仅适用于#13470-13476)
- 通过向小瓶中加入50 µL DMSO制备250X储备液。
- 根据需要处理细胞。
- 以1:250的比例将250 X DMSO储备溶液添加到细胞溶液中(例如2 µL至500 µL细胞),并将细胞在37°C,5%CO2的培养箱中孵育1小时。
- 用HHBS清洗细胞至少一次。
- 通过流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。
13403 Caspase 3/7抑制剂 Ac-DEVD-CHO Ac-DEVD-CHO 1 mg 13405 Caspase 3/7显色底物 Ac-DEVD-pNA Ac-DEVD-pNA 5 mg 13406 Caspase 3/7荧光底物 FITC-C6-DEVD-FMK 绿 FITC-C6-DEVD-FMK 1 mg